超声造影定量分析兔肝缺血再灌注损伤微循环的变化

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目的 本研究通过应用超声造影(Contrast-enhanced ultrasound,CEUS)定量分析兔肝缺血再灌注损伤(Ischemia-reperfusion injury,IRI)阻断前及再灌注后不同时间点造影剂灌注情况,无创性评估肝IRI中微循环变化的应用价值。方法健康新西兰成年兔45只,雌雄不限,体重2.5~3.5kg,3-4月龄,由广西医科大学实验动物中心提供,利用动脉夹闭肝门部方法阻断入肝血流建立兔肝IRI模型。将45只健康成年兔随机分三组,每组15只,假手术组A组,肝门阻断组B组,肝门阻断部分肝切组C组,分别于阻断前、再灌注Oh、1h、6h、24h5时间点行CEUS检查,脱机绘制时间-强度曲线(time-intensity curves,TIC),分别测算最大峰值强度(maximum intensity,IMAX).上升时间(rising time,RT)、达峰时间(time to peak,TTP)、平均渡越时间(mean transit time,mTT)四个TIC定量参数。与超声造影检查同时间点自颈外静脉采血、取肝组织,分别检测血清门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase, AST).丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase, ALT)水平和制备病理切片、染色及组织病理学观察。结果超声造影定量分析,组间比较,B组、C组与A组比较,阻断前不同TIC参数无统计学差异(p>0.05),再灌注相同时间点参数RT、TTP增大,差异有统计学意义(p<0.05),参数IMAX、mTT再灌注0h、1h,差异无统计学意义(p>0.05),再灌注6h、24h参数IMAX减小,mTT增大,差异有统计学意义(p<0.05)。组内比较,A组不同时间点不同参数差异无统计学意义(p>0.05),B组、C组再灌注不同时间点参数RT、TTP较阻断前增大,差异有统计学意义(p<0.05),再灌注Oh、1h差异无统计学意义(p>0.05),再灌注1h、6h、24h呈递增趋势,差异有统计学意义(p<0.05),参数IMAX、mTT阻断前、再灌注Oh、1h差异无统计学意义(p>0.05),再灌注6h、24h与阻断前比较,IMAX呈逐渐降低,mTT呈逐渐增高的趋势,差异有统计学意义(p<0.05)。实验室检查,组间比较,A组再灌注不同时间点血清ALT、AST水平均小于B组、C组,差异有统计学意义(p<0.05),B组、C组不同时间点血清ALT、AST水平无统计学意义(p>0.05),组内比较,A组不同时间点血清ALT、AST水平差异无统计学意义(p>0.05),B组、C组再灌注各时间点较阻断前增大,差异有统计学意义(p<0.05),再灌注各时间点血清ALT、AST水平呈逐渐升高趋势,差异有统计学意义(p<0.05)。病理检查,B组、C组再灌注Oh表现为肝细胞水肿、肝窦间隙变窄,大量红细胞聚集于肝窦及中央静脉(central vein, CV)内阻塞管腔,微血栓形成;随着再灌注时间的延长,再灌注1h可以看到红细胞聚集于肝窦状隙及汇管区,阻塞管腔,造成微循环障碍,汇管区出现少量中性粒细胞;再灌注6h后可见肝细胞水肿加重呈气球样变性,并可看到广泛的中性粒细胞浸润。再灌注24h肝细胞萎缩,坏死,肝窦塌陷。结论超声造影定量分析能够无创性、客观且准确的评估肝IRI微循环的变化。
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