氢气饱和生理盐水抑制大鼠腹主动脉瘤形成的实验研究

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【目的】通过观察AAA大鼠主动脉的直径、血管壁厚度、张开角,阐述氢气饱和生理盐水对瘤壁组织改建、主动脉残余应力的影响,探究其对动脉瘤形成的抑制作用,进一步就炎症、氧化应激通路,探讨氢气作用于AAA的机制,为预防及临床治疗AAA提供新的策略。【方法】1.选取健康雄性SD大鼠,行氯化钙孵育肾下腹主动脉制成AAA模型,随机分为2组:实验组腹腔内注射氢气饱和生理盐水5ml/kg·d,对照组注射生理盐水。2.28天后观察两组大鼠主动脉直径变化的情况,通过计算机图像分析软件测量主动脉管壁的厚度变化以及测量主动脉张开角以此评估大鼠主动脉的残余应力。3.对标本进行HE染色和弹力纤维特殊染色观察主动脉的结构变化,损伤程度以及弹力纤维的破坏和降解情况。4.免疫组化观察动脉瘤组织rCKLF-1、MMP-2、MMP-9的蛋白表达。5.Real-time PCR测定rCKLF-1、MMP-2、MMP-9的基因表达。6.ELISA试剂盒检测标本IL-1β、TNF-α浓度。7.分光光度法检测标本MDA、SOD含量。【结果】1.腹主动脉直径扩张50%以上即可诊断AAA,本研究两组均达到该诊断标准,成瘤率为100%。实验组与对照组的扩张率分别为65%和128%,差异有统计学意义(P<0.01)。2.与对照组相比,实验组主动脉的直径、血管壁厚度明显减小,主动脉张开角明显增大,差异有统计学意义(P<0.01)。3.实验组动脉壁弹力纤维未见明显受损,仅有少量炎症细胞浸润及rCKLF-1、MMP-2、MMP-9弱阳性表达。对照组动脉壁弹力纤维严重受损,可见明显炎症细胞浸润,rCKLF-1、MMP-2、MMP-9强阳性表达。4.rCklf1mRNA在实验组和对照组AAA组织中的相对含量分别为2.24±0.87和4.63±1.05(P<0.01)。MMP-2mRNA相对含量分别为2.34±0.85和11.64±2.51(P<0.01)。MMP-9mRNA相对含量分别为2.87±0.55和6.66±0.89(P<0.01)。5.IL-1β在实验组和对照组AAA组织中的浓度分别为86.23±7.80pg/ml和139.37±6.64pg/ml (P<0.01),TNF-α的浓度分别为89.50±13.33pg/ml和354.68±39.66pg/ml (P<0.01)。6.MDA在实验组和对照组AAA组织中的浓度分别为1.52±0.38U/mg和4.81±0.22U/mg (P<0.01),SOD的浓度分别为84.03±3.50U/ml和66.11±10.61U/ml (P<0.01)。【结论】1.氢气饱和生理盐水能够通过增大主动脉的残余应力、减轻管壁的组织重建程度,来维持主动脉更好的力学特性,减少主动脉的扩张,抑制AAA的形成。2.氢气抑制AAA形成的机制包括以下几点:(1)减少血管壁蛋白水解酶的表达,抑制中膜弹力纤维的降解;(2)改善炎性细胞浸润,减少趋化因子、炎性介质释放,减轻炎症损伤;(3)减轻组织过氧化,增强抗氧化酶活性,减轻氧化应激损伤。
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