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食源性疾病是由于摄入食品在人体内引起感染和中毒的疾病,是世界范围内的重要公共卫生问题。食物中毒是最典型的食源性疾病,细菌性食物中毒居各类食物中毒的首位,在我国过去对食物中致病菌的研究中,重点多放在流行病学和临床治疗用药上,对于食物中致病菌的耐药性研究相对较少,有必要对食物中致病菌的耐药现状进行研究。PFGE分型能有效地反映出受试菌的流行病学相关性。微波对食物的灭菌应用广泛。在日常生活中人们常将熟食物冷藏在冰箱中,食用前将其用微波炉加热。因此,本研究旨在探讨熟食物在冰箱中有效地冷藏时间,分离菌的药物敏感情况,同种菌的相关性,家用微波炉日常加热杀菌时效,对预防食物中毒的发生及有效地治疗具有重要意义。一、熟菜品冷藏时间与分离菌的相关性分析目的:1.了解熟菜品在冰箱冷藏(4-8℃)下有细菌生长的时间;2.了解分离菌的药敏情况;3.了解分离的同种细菌的相关性。方法:1.60份熟热菜品取自2010~2011年6-8月天津市某三级甲等医院食堂,每份约300g,放入密闭高压灭菌饭盒中,置于冰箱中冷藏0、24、48、72小时分离细菌,细菌分离及菌落总数测定参见《食品卫生微生物学检验》国家标准(GB4789-2010),细菌鉴定采用常见细菌系统鉴定手册。2.采用K-B纸片扩散法测试分离出的革兰氏阴性菌对左氧氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、头孢吡肟、头孢他啶、阿米卡星、哌拉西林、头孢氨噻肟、头孢哌酮、头孢曲松、哌拉西林/三唑巴坦、庆大霉素共12种抗菌药物的敏感性;革兰氏阳性菌对青霉素、苯唑西林、氨苄西林、头孢唑林、环丙沙星、加替沙星、氯霉素、林可霉素、庆大霉素、头孢曲松、亚胺培南、红霉素共12种抗菌药物的敏感性。3.对分离的同种细菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析:限制性内切酶XbaI、SfiI分别酶切15株大肠杆菌和8株普通变形杆菌基因组DNA后,进行脉冲场凝胶电泳。结果:1.在室内环境平均温度26℃,平均湿度75%下,冰箱冷藏条件下,有16份(26.67%)、17份(28.33%)、17份(28.33%)、10份(16.67%)熟菜品分别于冷藏0、24、48、72小时分离出细菌;7份西胡肉(100%)、7份茄子肉(100%)、7份木须肉(87.50%)、7份芹菜肉(87.50%)在冷藏24小时内即可分离出细菌;共分离出60株细菌,以肠杆菌科(63.33%)为主,其次是葡萄球菌属(11.67%),微球菌属(10.00%),假单胞菌属(8.33%)和枯草芽孢杆菌(6.67%);菌落总数测定为0.32x105~12.00x105cfu/g,共有31份(51.67%)熟菜品菌落总数超过GB2726-2005《熟肉制品卫生标准》的规定(≤8.0×104cfu/g)。2.药物敏感性分析显示:15株大肠杆菌对左氧氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、阿米卡星、头孢哌酮、庆大霉素的耐药率分别为13.33%、13.33%、13.33%、6.67%、6.67%、13.33%;8株普通变形杆菌对庆大霉素的耐药率为12.50%。3.PFGE显示15株大肠杆菌分为14型,每株有9-18条带型,菌株间相似性系数为21.10%~91.20%;8株普通变形杆菌分为7型,每株有14~19条带型,菌株间相似性系数为34.50%-100%。3.结论:熟菜品在冰箱冷藏72小时即全部有细菌生长;分离出的细菌对药物的耐药率较低;PFGE显示菌株表现出较大的遗传多样性。二、家用微波炉对熟菜品杀菌时效分析目的:探讨家用微波炉对熟菜品的杀菌时效。方法:用微波炉对300g熟菜品进行不同时间的加热,对加热后的熟菜品分离细菌。结果:家用微波炉对300g熟菜品加热1分钟和2分钟,经培养后均有细菌生长,加热3分钟,温度达75℃以上,经培养后未分离到细菌。结论:家用微波炉对300g熟菜品加热3分钟,温度达75℃及以上可达有效地灭菌效果。