miR-552和miR-592在结直肠肿瘤中表达的研究

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:linxuekai
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目的Micro RNAs是重要的基因调控因子,被认为在肿瘤发生过程中起着关键的作用。本课题组前期芯片研究显示mi R-552和mi R-592在结直肠癌组织中表达水平显著升高。查阅文献资料,已有一些研究报道了mi R-552和mi R-592在结直肠肿瘤中异常表达。因此,本研究以mi R-552和mi R-592为研究对象,检测mi R-552和mi R-592在结直肠癌组织中及一些肠癌细胞株中的表达情况;构建mi RNA抑制性载体并包装慢病毒,在体外实验中探讨mi R-552和mi R-592的表达水平变化对结直肠癌生物学行为的影响。方法1.Real-time RT-PCR方法检测mi R-552和mi R-592在50例结直肠癌组织及4种结直肠癌细胞株中的表达情况;结果与这些组织样本的的临床病理特征进行分析。2.构建mi RNA的抑制表达载体并包装慢病毒,转染Lovo和LS174T细胞,筛选出稳定表达的细胞株。3.MTT、平板克隆和划痕实验分别检测mi RNA对细胞增殖和迁移的影响结果1.mi R-552和mi R-592在结直肠癌组织及肿瘤细胞株中的表达:我们检测的50例结直肠癌组织中mi R-552和mi R-592的表达均较邻近正常肠组织上调;mi R-552在肠癌细胞株Lovo、LS174T,mi R-592在肠癌细胞株Lovo、LS174T、HCT116、SW480中的表达水平均较人正常肠细胞CCD-18Co上调,结果与组织中的表达情况一致。与临床病理特征分析显示,mi R-552和mi R-592特异性高表达与结直肠癌组织TNM分期及肿瘤是否存在淋巴结转移密切相关,而与其他临床病理特征无关。2.稳定转染后,细胞生长减慢,克隆形成减少,细胞迁移能力降低。结论mi R-552和mi R-592在结直肠癌组织和细胞中均呈高表达,抑制mi RNA表达可降低细胞的增殖和迁移能力,mi R-552和mi R-592可能对结直肠肿瘤的生物学行为有重要的调控作用。
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