溶磷微生物在转化土壤难溶磷、提高磷肥利用率和促进作物生长等方面具有显著作用,然而在实际应用中,其效果会受到菌株退化、作物种类、土壤特性、气候条件、溶磷菌与其它微生物间的交互作用等影响。克隆溶磷相关基因研究其表达特性,从而构建高效、稳定的溶磷菌株是解决上述问题的一个重要思路。本文构建黑曲霉H1的cDNA文库,利用磷酸三钙为唯一磷源筛选溶磷相关基因,对溶磷相关基因进行生物信息学分析,并对其功能进行初步鉴定。利用SMART技术构建黑曲霉H1的全长cDNA文库,初级库容量为5.65×106cfu/mL,重组率为99.15%。通过难溶磷固体培养基筛选,得到具有溶磷圈的转化子61个,其中转化子H-54和H-47的性能稳定。转化子H-54携带的cDNA序列全长为 839 bp,与Aspergillus niger CBS 513.88 和A.niger contig An07c0100 的相似性分别达到99%和100%,与其它的基因序列相似性很低,将其命名为psgA。转化子H-47 携带的 cDNA 序列全长为 625 bp,与 A niger CBS 513.88 和 A.niger contig An13c0090的相似性均达到99%,与其它的基因序列相似性很低,将其命名为psgB。通过溶液pH值、可溶磷含量变化及胞外产物的分析对psgA的溶磷功能进行初步鉴定,结果表明,转化子H-54在液体难溶磷培养基中培养,提高了有机酸的表达量,并增加了有机酸的种类,在培养12h后,溶液中开始产生甲酸和乙酸,培养24h后,溶液中产生苹果酸和α-酮戊二酸,培养36 h后,溶液pH值由6.32降到3.93,可溶磷含量达到0.105 mg/mL。构建溶磷相关基因psgB的重组表达载体,用同样的方法对psgB的溶磷功能进行初步鉴定,结果表明,重组转化子溶磷效果明显增强,培养24h时产生甲酸、乙酸、苹果酸和柠檬酸,将溶液pH降至3.70,可溶磷含量达到最高,为0.1077 mg/mL。