缢蛏(Sinonovacula constricta)隶属软体动物门(Mollusca),瓣鳃纲(Lamellibranchia),异齿亚纲(Heterodonta),帘蛤目(Veneroida),竹蛏科(Solenidae),缢蛏属(Sinonovacula),广泛分布于我国浙江、福建、江苏、辽宁和山东等沿海省份。缢蛏食用方法多样且具有一定的医用价值,在养殖过程期间比较易于管理,具有高产量及养殖周期短等特点深受人们的喜爱。目前我国缢蛏养殖处于养殖面积减少,养殖产量稳定增加的现状。2018年本科研团队成功培育出了我国第一个缢蛏新品种“申浙1号”,在体重、出肉率等方面进行了提升。为进一步培育缢蛏抗逆新品系,保证缢蛏产业健康可持续发展,进行了本次实验。实验主要包含高温应激环境下缢蛏SOD、CAT和T-AOC三种酶活性的测定分析,热应激相关基因HSF1的基因克隆、序列分析及表达,缢蛏耐热新品系的早期选育及筛选三个方面,具体研究结果如下:1、本实验探究了缢蛏“申浙1号”在受到急性高温胁迫条件下过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和总抗氧化能力三种相关免疫指标在48h内的变化,测量不同高温应激条件下不同时间节点缢蛏肝胰腺组织内三种酶活性的变化规律。将缢蛏从暂养水温(24℃)分别直接转移至27℃、30℃、33℃、36℃,实验结果显示各实验组肝胰腺中三项相关免疫指标随时间增加变化显著。在前期CAT、SOD和T-AOC显著升高,12h之后逐渐下降恢复到初始水平左右。实验结果显示高温胁迫会引起缢蛏体内的抗氧化免疫发生显著变化,进而可能对缢蛏的生长和存活产生影响。将为评价缢蛏“申浙1号”抗热性能、热应激后活性氧代谢影响及缢蛏耐热新品系的培育提供理论依据。2、利用RACE技术克隆HSF1基因,结果显示,缢蛏HSF1基因的c DNA全长总共2026 bp,开放阅读框长为1707 bp,共编码568个氨基酸,5’非编码区长为196 bp,3’非编码区长为123bp。通过氨基酸序列比对及系统进化树软件分析,从分析结果中可看出缢蛏HSF1基因与美洲牡蛎(Crassostrea virginica)的亲缘关联最为接近,系统进化分析的结果也与传统形态学分类相符合。通过荧光定量PCR结果可看出在各个组织中HSF1基因都有表达,其中外套膜中的相对表达量最高,其次是鳃、肝胰腺和水管,在斧足和性腺组织的相对表达量较低(P<0.05)。荧光定量结果显示HSF1基因在急性高温应激后9h刺激下表达量较高。推测HSF1基因参与到缢蛏热应激过程中,并起一定作用。3、为培育缢蛏抗高温品种(系),在10个全同胞家系中筛选3个耐高温家系(A、B、C),比较早期不同发育阶段缢蛏幼虫的半致死温度,并对各家系2、4、6、10、20、30日龄幼虫的生长、存活情况和抗高温性能进行了监测。结果表明:家系C较其他家系生长显著(P<0.05),在室内30、32、34、36、38℃温度下测定10(附泥期)、20、30(出苗期)日龄幼虫的半致死温度,发现同一时期内家系间的半致死温度有显著性差别(P<0.05),且家系C的存活率显著高于其他家系(P<0.05)。研究表明,以半致死温度为衡量指标,在缢蛏快生长选育系新品种"申浙1号"基础上进行家系耐高温定向选育,可实现在缢蛏家系幼体期进行耐高温性能提前筛查,本试验结果可为耐高温品种选育工作提供基础数据。