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柑橘是全球最重要的水果之一,在世界各地深受欢迎。据报道,柑橘在其采后贮运期间,因病原菌侵染产生的采后病害造成极大经济损失。目前,柑橘采后病害的防治主要依靠化学药剂。但长期使用化学杀菌剂会使病原菌产生抗药性从而降低防治效果。此外,杀菌剂的滥用所造成的环境污染和健康问题已经引起全球的关注。因此,人们需要寻找一种安全有效的新型柑橘采后病害防治方法。近年来,生物防治控制果蔬采后病害被证明是一种行之有效的方法。很多拮抗酵母菌被报道可以显著抑制柑橘采后病害的发生。但目前在半商业化条件下酵母菌往往不如杀菌剂的效果好。因此,本课题的研究重点是筛选出具有高效拮抗效果的酵母菌,并将其和卵磷脂联合使用以提高酵母菌对柑橘采后绿霉病的拮抗效力。本论文的主要研究内容有:(1)筛选到生防效果优良的酵母菌种;(2)卵磷脂结合拮抗酵母对柑橘采后绿霉病的控制效力测定;(3)卵磷脂结合葡萄汁有孢汉逊酵母诱导柑橘产生抗病性的可能机制研究。主要试验结果如下:(1)经离体及活体筛选,最终得到拮抗酵母菌Y1,Y2,Y3和Y4在果实试验中对柑橘指状青霉菌(Penicillium digitatum)表现出较好的抑菌效果,其中Y3菌株效果最好。对Y1,Y2,Y3和Y4四株菌株进行形态学观察和分子基因序列的鉴定,鉴定Y1为Issatchenkia hanoiensis,Y2为Candida zemplinina,Y3为Hanseniaspora uvarum,Y4为Pichia manshurica。目前,拮抗酵母菌Y3在柑橘采后病害生物防治中的应用尚未见报道。(2)H.uvarum在浓度为1×106、1×107、1×108和1×109(cells/mL)条件下都显著地降低了果实的腐烂率和腐烂直径,且酵母浓度越高,效果越好。不同浓度卵磷脂结合处理能提高拮抗酵母H.uvarum对柑橘绿霉病的拮抗效果,且卵磷脂浓度为1.5%w/v时,拮抗效果最好,其腐烂率和腐烂直径分别降低了93.5%和5.6 mm。观察结果表明,卵磷脂(1.5%w/v)提高了葡萄汁有孢汉逊酵母在柑橘伤口处的生长动态。与对照组相比,H.uvarum单独处理显著降低了柑橘采后自然腐烂率,H.uvarum与卵磷脂(1.5%w/v)结合使用显著增强了拮抗酵母对柑橘采后自然腐烂率的抑制作用。各处理没有对柑橘的贮藏品质造成显著的不利影响,且结合处理显著降低了柑橘采后失重率。(3)H.uvarum结合卵磷脂防治柑橘采后绿霉病可能的生理机制包括:促进酵母菌在果实伤口处的生长,与病原菌的营养和空间竞争能力加强;抑制致病菌在果实伤口处的孢子萌发和菌丝生长;通过调节果皮抗性酶,活性氧代谢和脂质过氧化作用,增强了水果对病原菌的抗病性。