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目的:模拟人类吸烟状态,建立大鼠吸烟模型,观察吸烟对大鼠睾丸组织的损害作用,分析Notch信号通路关键信号分子Notch1、Notch2的mRNA及蛋白表达水平,从而探讨Notch信号通路在香烟烟雾所致睾丸毒性中的作用。方法:SPF级成年健康SD雄性大鼠200只,随机分为对照组和低、中、高剂量染毒组(每组10只,分别给予0支/天、10支/天、20支/天、30支/天)。染毒组采用呼吸道静式染毒,每日一次,每次30min,各组大鼠分别染毒2、4、6、8、12周,实验期间记录各组大鼠的体重。实验结束后,取睾丸和附睾观察其形态,计算睾丸系数和附睾系数,测定睾丸组织AKP、γ-GT、β-GD和G-6-PD活力;HE染色观察睾丸组织形态学改变;IHC法检测睾丸组织中Notch1、Notch2表达情况;RT-PCR及Western Blot法检测大鼠睾丸组织中Notch1、Notch2基因mRNA及蛋白的表达。结果:1.随着染毒剂量的增加和染毒时间的延长,各染毒组大鼠体重增长缓慢(P<0.05);各染毒组睾丸系数和附睾系数较同期对照组比较有下降趋势。2.HE染色结果显示,染毒组睾丸组织较同期对照组出现不同程度的病理损伤。3.随着染毒剂量的增加和染毒时间的延长,各染毒组睾丸组织中AKP、γ-GT、β-GD、G-6-PD活力呈下降趋势(P<0.05)。4.IHC结果显示,与同期对照组比较,睾丸组织中Notch1蛋白阳性表达的面积在第2、6周的中剂量组开始增大(P<0.05),第4、8周的各染毒组和第12周的高剂量组增大(P<0.05);Notch1蛋白阳性表达的面积在对照组的第12周和低剂量组的第8周大于第2周(P<0.05),存在染毒剂量和染毒时间的交互效应。睾丸组织中Notch2蛋白阳性表达的面积在第2、6、8周的中、高剂量组,第4周的低、高剂量组和第12周的高剂量组大于同期对照组(P<0.05);Notch2蛋白阳性表达的面积在对照组的第6周,低剂量组的各染毒周组和中、高剂量组的第6周大于第2周(P<0.05),染毒剂量和染毒时间存在交互效应。5.RT-PCR结果显示,睾丸组织中Notch1基因mRNA表达水平在第2、6、12周的中、高剂量组和第4、8周的高剂量组高于同期对照组(P<0.05),染毒剂量和染毒时间不存在交互效应。睾丸组织中Notch2基因mRNA表达水平在第2、4、6、8周的中、高剂量组和第12周的高剂量组高于同期对照组(P<0.05),高剂量组的第8周高于第2周(P<0.05),染毒剂量和染毒时间不存在交互效应。6.WB结果显示,第4、8、12周的各染毒组,第2周的低、中剂量组和第6周的中剂量组睾丸组织中Notch1蛋白表达水平高于同期对照组(P<0.05),低剂量组的第12周和中剂量组的第8、12周Notch1蛋白表达水平高于第2周(P<0.05),染毒剂量和染毒时间存在交互效应。第4、6、12周的各染毒组,第2周的低剂量组和第8周的低、中剂量组睾丸组织中Notch2蛋白表达水平高于同期对照组(P<0.05),低剂量组的第8、12周和高剂量组的第4、12周Notch2蛋白表达水平高于第2周(P<0.05),染毒剂量和染毒时间存在交互效应。结论:香烟烟雾暴露可致睾丸组织结构损伤,改变大鼠睾丸组织中AKP、γ-GT、β-GD、G-6-PD的活力,染毒剂量和染毒时间在大鼠睾丸组织中的γ-GT、β-GD、G-6-PD活力测定中存在交互效应;增加Notch1、Notch2的mRNA及蛋白表达,染毒剂量和染毒时间在大鼠睾丸组织中的Notch1、Notch2蛋白表达水平中存在交互效应,从而引起睾丸组织损伤。