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高效毛细管电泳是一种结合了电泳技术和色谱理论的新型液相分离技术,具有高效、快速、分离模式灵活、自动化程度高、样品消耗量少的优点,在分离分析领域应用广泛。基于此,本文针对未见报道的采用高效毛细管电泳进行分离分析的几类药物活性成分,及未见报道的采用高效毛细管电泳进行研究的酶促反应,开展研究。建立了3个同时分离分析三类药物活性成分,及1个酶促反应动力学研究的高效毛细管电泳新方法。论文的具体研究内容如下:1、采用运行介质为含 5 mmol/L β-CD、19 mmol/L SDS、33%(v/v)乙腈、0.3%(v/v)四氢呋喃的 H3PO4-NaH2P04 的缓冲液(NaH2PO4浓度为 38 mmol/L,pH 4.09),分离电压25 kV,柱温25℃,PDA检测波长230 nm,压力0.5 psi(3447.38 Pa)进样5 s的电泳条件,建立了一个同时分离测定汉防己甲素、汉防己乙素和盐酸小檗胺三种组分的胶束毛细管电泳新方法。3种组分在25 min内达到基线分离和有效检测,其质量浓度分别在3.0～120.0、5.0～100.0和10.0～100.0μg/mL范围内与其峰面积线性关系良好。将该方法用于汉防己药材中这3种成分的含量测定,样品中各目标成分的加标回收率均在96.8%～104.2%之间,相对标准偏差均小于4.0%。2、在详细优化了缓冲溶液的pH、有机添加剂的种类、浓度和仪器条件的基础上,新建了一个简单、快速且能同时分离测定长春碱、长春新碱、长春质碱和文多灵4种组分的高效毛细管区带电泳方法。在含2.0%(v/v)正丁醇和10%(v/v)乙腈的 H3P04-NaH2PO4 缓冲溶液(NaH2PO4 浓度为 39mmol/L,pH4.31),分离电压20 kV,柱温25℃,PDA检测器(检测波长214nm),压力0.5 psi(3447.38 Pa)进样5 s的电泳条件下,4种组分在14 min内均能基线分离,测定的线性范围依次为5.0～150.0、5.0～150.0、2.5～150.0和5.0～250μg/mL。用该方法测定了不同品种的长春花中这4种成分的含量,样品中各目标成分的加标回收率均在93.7%～108.9%之间,相对标准偏差均小于4.0%。3、在电解质溶液为含1.2%(v/v)三乙醇胺、0.3%(v/v)四氢呋喃和2.0%(v/v)异丙醇的硼砂(30mmol/L)-NaH2PO4(10mmol/L)缓冲溶液(pH8.64),采用分离电压20 kV,柱温25℃,PDA检测器(检测波长326 nm),0.5 psi(3447.38 Pa)压力进样3 s的电泳条件下,新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、异绿原酸A、1,5-二咖啡酰奎宁酸、异异绿原酸C、绿原酸B和1,3-二咖啡酰奎宁酸在17 min内实现分离与测定,这8个组分的线性范围依次为5.0～100.0、5.0～120.0、2.5～180.0、5.0～160.0、5.0～180.0、5.0～120.0、5.0～120.0、5.0～180.0 μg/mL。将该方法用于金银花及其制剂中这8种成分的含量测定,样品中各目标成分的加标回收率均在92.6%～106.8%之间,相对标准偏差均小于5.0%。4、采用高效毛细管电泳结合酶促反应动力学,选用以对硝基苯酚α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物的α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选模型,建立了一个α-葡萄糖苷酶抑制剂体外筛选的新方法。在优化后的最佳酶促反应条件下进行酶促反应,在由30.0 mmol/L硼砂-4.0 mmol/L氢氧化钠溶液组成的缓冲溶液(pH 9.36),分离电压25 kV,柱温25 ℃,PDA检测波长314 nm,压力0.5 psi(3447.38 Pa)进样5 s的电泳条件下分离测定剩余反应底物和反应产物对硝基苯酚(PNP),分别测试了木犀草素、姜黄素、银杏叶提取物和洋葱提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制效果,测得其IC50值分别为11.96 μg/mL、51.44μg/mL、4.27 mg/mL和8.17 mg/mL。研究了木犀草素和姜黄素对α-葡萄糖苷酶均为竞争抑制类型,抑制常数分别为1.41 mg/L 和 1.72 mg/L。