全反式维甲酸对人肺腺癌A549细胞放射敏感性的影响

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目的:研究全反式维甲酸(All-trans retinoic acid,ATRA)对体外培养的人肺腺癌A549细胞的放射敏感性的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:对数生长期的A549细胞,分为对照组、单纯ATRA组、单纯照射组、联合组(ATRA+照射组)。通过MTT法检测细胞的生长抑制率并筛选ATRA的最佳实验浓度;采用克隆形成实验分析细胞的放射敏感性;流式细胞术分析各组的细胞周期及凋亡;RT-PCR法检测各组VEGFmRNA表达;ELISA法检测各组细胞上清液中VEGF含量。结果:1. ATRA对A549细胞有增殖抑制作用,并呈现时间-剂量依赖关系。选择10μmol/L的ATRA作为最佳实验浓度。2.联合组的SF2、N、D0、Dq值均低于单纯照射组(0.889vs0.82、4.157vs3.953、3.432vs2.449、2.283vs1.858,P<0.05)。在一定程度上,ATRA能增加A549细胞的放射敏感性。3.单纯ATRA组的G0/G1期比例较对照组明显增加[(56.45±1.26)%vs (47.88±1.04)%,P<0.05]。6Gy照射组的G2/M期比例较对照组明显增加[(33.89±1.24)%vs (24.75±0.85)%,P<0.05]。4.联合组凋亡率较单纯ATRA组及6Gy照射组明显增加[(25.17±0.81)%vs (15.64±0.73)%,(25.17±0.81)%vs (18.01±1.05)%,P<0.05]。单纯ATRA、6Gy照射组及联合组的凋亡率与对照组相比明显增加[(15.64±0.73)%、(18.01±1.05)%、(25.17±0.81)%vs (7.63±0.52)%,P<0.05]。5. ATRA组的VEGF mRNA表达与对照组相比明显降低(1.329±0.027vs1.685±0.031,P<0.05),6Gy照射组的VEGF mRNA表达与对照组相比明显增加(1.834±0.042vs1.685±0.031,P<0.05),联合组VEGF mRNA表达较6Gy照射组明显降低(1.517±0.034vs1.834±0.042,P<0.05)。6. ATRA组的VEGF水平与对照组相比明显减少(P<0.05),6Gy照射组的VEGF水平与对照组相比明显增加(P<0.05),联合组VEGF水平较6Gy照射组明显减少(P<0.05)。结论:ATRA对A549细胞具有放射增敏作用,其作用机制可能与ATRA对A549细胞的增殖抑制、诱导凋亡和下调肿瘤细胞VEGF的表达有关。
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