【摘 要】
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卤虫(Artemia parthenogenetica)是一类孤雌生殖的甲壳动物。在适宜的环境中,采用卵胎生生殖,直接产下无节幼体;当环境变得恶劣时,采用卵生生殖,产下包被着外壳的休眠卵以延续
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卤虫(Artemia parthenogenetica)是一类孤雌生殖的甲壳动物。在适宜的环境中,采用卵胎生生殖,直接产下无节幼体;当环境变得恶劣时,采用卵生生殖,产下包被着外壳的休眠卵以延续自己的种群。这些休眠卵可以在恶劣的环境中存活上千年。卵黄蛋白原是卵黄蛋白的前体,对胚胎发育起着至关重要的作用。针对卤虫中存在的两种胚胎发育模式,我们研究比较了两种模式下的卵黄蛋白原的基因表达和蛋白酶解过程。首先通过N端蛋白氨基酸测序,PCR扩增及cDNA文库构建和筛选等技术,成功克隆到一个6778bp的卵黄蛋白原基因,其编码了2219个氨基酸。对其氨基酸序列进行分析,发现其N端含有一个过氧化物歧化酶(SOD)结构域,这是除了在大型蚤(Daphnia magna)中,在其他物种中从没有报道过的独特结构。通过Northern blot分析及原位杂交技术,发现卤虫卵黄蛋白原基因在头胸部的连接组织中大量表达,相对在卵巢中只有十分微弱的表达。免疫组化结果显示,卵黄蛋白主要分布于卵巢中的卵中。Western blot分析追踪了卵黄蛋白原的酶切过程。通过比较两种生殖方式中卵黄蛋白的变化,发现SOD偶联的卵黄蛋白在卵生生殖的卤虫胚胎发育过程中逐渐累积,相对的在卵胎生生殖的卤虫胚胎发育过程中却是逐步降解的。这一现象从侧面揭示了SOD偶联的卵黄蛋白在卤虫休眠过程中具有特殊的作用。
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