不同培养条件对牛体外受精早期胚胎体外发育的影响研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shiguangli010
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究利用屠宰黄牛卵巢,对卵巢表面2~8mm卵泡卵母细胞经体外成熟、体外受精后的早期胚胎,与不同的体细胞共培养及在有不同添加物的胚胎培养液中的后续发育进行了研究,并探讨了其影响因素,以期筛选出最佳的体外培养条件,结果显示: 1.牛体外受精后早期胚胎与颗粒细胞和输卵管上皮细胞共培养有助于胚胎的体外发育。尽管卵裂率与对照组均无显著差异(P>0.05),但桑葚胚率均显著高于对照组(P<0.05);与输卵管上皮细胞共培养组的囊胚率显著高于对照组(P><0.05),而与颗粒细胞共培养组的囊胚率与对照组无显著差异(P>0.05);试验组的孵化囊胚率(14.2%和17.3%)均极显著高于对照组(0%)(P<0.01);试验组之间的卵裂、桑椹胚、囊胚率均未出现差异(P>0.05)。 2.比较了牛体外受精胚胎基础培养液中添加5%和10%FBS后,对胚胎后续发育的影响,结果显示添加10%FBS组的卵裂率显著高于不添加血清的对照组(P><0.05),但与添加5%FBS组的卵裂率差异不显著(P>0.05),甚至以添加5%FBS组较高;囊胚率显著高于对照组和5%FBS添加组(P<0.05);对照组未出现孵化囊胚,试验组均出现孵化囊胚,且10%添加组(14.2%)显著高于5%添加组(3.7%)(P<0.05),这表明胎FBS对牛早期胚胎发育有促进作用,以10%添加量为最佳。 3.探讨了添加不同浓度的牛磺酸对牛IVF后胚胎桑椹胚率、囊胚率和孵化囊胚率的影响并比较了胚胎的不同发育阶段添加牛磺酸对胚胎的后续发育情况。基础培养液(对照组)中分别添加7和14mM的牛磺酸(试验组)后,其卵裂率、桑椹胚率分别为90.0%、89.6%和48.1%、47.4%均与对照组无显著差异(P>0.05);添加7mM牛磺酸组的囊胚率(26.4%)显著高于对照组(21.0%)和添加14mM组(22.3%)(P<0.05);试验组与对照组孵化囊胚率分别为21.8%、18.7%和14.2%,差异不显著(P>0.05),而囊胚总细胞数显著高于对照组(P<0.05)。IVF后2细胞、4~8细胞及8~16细胞期,在基础培养液中分别添加7mM的牛磺酸时,桑椹胚率分别为48.7%、57.1%、52.0%,囊胚率分别为25.1%、30.7%、27.9%,孵化囊胚率分别为25.9%、28.6%、25.0%;而添加14mM牛磺酸组时,桑椹胚率分别为50.4%、56.4%、55.4%,囊胚率分别为26.5%、31.3%、27.7%,孵化囊胚率分别为27.5%、31.1%、29.9%。结果表明,当体外发育培养液中添加牛磺酸可显著提高桑椹胚率和囊胚率(P<0.05),并且在4~8细胞期添加牛磺酸最为合适。 4.牛IVF后早期胚胎体外发育时向其基础培养液(对照组)中加入50和100μM的β-ME(试验组),其桑椹胚率分别为48.1%和47.4%,囊胚率分别为26.4%和22.3%,均极显著高于对照组的桑葚胚和囊胚率(43.2%、21.0%)(P<0.01);孵化囊胚率分别为16.2%和17.0%与对照组(14.2%)差异不显著(P>0.05);囊胚总细胞数也均无显著差异(P>0.05)。IVF后2细胞、4~8细胞及8~16细胞期,在基础培养液中分别添加50μM的β-ME时,桑椹胚率分别为52.2%、58.2%、54.8%,囊胚率分别为25.8%、31.8%、29.3%,孵化囊胚率分别为16.2%、16.0%、17.4%,桑葚胚率、囊胚率均与对照组(43.2%、21.0%)差异显著(P<0.05),而孵化囊胚率与对照组(14.2%)差异不显著(P>0.05);而添加100μM的β-ME时,桑椹胚率分别为51.5%、57.4%、57.2%,囊胚率分别为26.1%、32.6%、30.3%,孵化囊胚率分别为15.7%、13.8%、16.4%,桑葚胚率、囊胚率均显著高于对照组(P<0.05),而孵化囊胚率与对照组也无显著显著(P>0.05);明显可以得出4~8细胞期添加β-ME可显著提高胚胎桑葚胚和囊胚发育率,但不能改善孵化囊胚的质量。
其他文献
1957年的一个春夜,深蓝色的天宇上闪烁着繁星,在北京一所寂静的四合院内,程砚秋独坐在书桌前,心潮澎湃。他点燃了一支雪茄烟慢慢吸起来,从纷乱的思绪中理出了头绪,然后铺开了稿纸,庄严地在上面写下了“入党申请书”几个字……  从一个不太关心政治的戏曲演员到立志成为共产党员,其间的变化何其大啊!这变化来自他对新旧社会的切身感受,更来自周恩来、贺龙等无产阶级革命家对他的关怀与帮助。    1956年,与周
问:我是一个读初一的学生,原来读小学的时候,我的成绩是不错的,一般都在90多分,至少也有80几分,在班里虽然不一定是前几名,但也不至于是最后几名。 Q: I was a student who
多效唑是一种高活性的植物生长延缓剂和广谱性杀菌剂。根据目前水稻苗期存在的易倒伏、苗不壮、分蘖不足的问题,如果在水稻苗期采用多效唑喷施,会得到明显的改善。方法是:在
建立血清中烟酸(NA)、烟酰胺(NM)及其代谢产物N′-甲基尼克酰胺(NMN)、2-吡啶酮(2Py)的测定方法。采用高效液相色谱法(HPLC),以氨基固相柱萃取样品,0.04mol/L KH2PO4提取洗脱
陈潭秋和徐全直是我党早期的著名领导者,为中国革命做出了突出的贡献。陈潭秋47岁在新疆遇害,徐全直就义时年仅31岁……他们相濡以沫、心心相印的革命情缘虽然消散于时间的漫
禽类输卵管的子宫阴道交接部和伞部存在着一种特殊的管状腺,这种腺体能使禽类精子在输卵管内长期存活,并且能够长时间保持其受精力,该腺体被称为贮精腺。禽类贮精腺能够大量
本文试图通过草坪的蒸散规律和草坪干旱诊断指标研究以及便携式简易草坪土壤水分测定仪的研制,促进草坪水分管理中草坪经济灌溉量和最佳灌溉时机的把握,实现草坪节水灌溉,减
对装运系统的传动方式、执行元件及主要元部件进行了结构分析,从而给出了装运系统合理、典型的结构形式。 The structural analysis of the transmission system, actuator a
本实验的目的是研究烟酸铜的合成、化学结构的鉴定和生物学功能,为饲料业开发利用安全、高效铜源提供理论依据。具体内容分成以下五部分: 1 烟酸铜的制备及结构分析 利
角蛋白的结构很稳定,具有不溶于水和抗分解的性质,不易为动物消化吸收和利用,而利用微生物发酵法能够提高羽毛角蛋白的利用价值,这对于缓解蛋白原料的供求矛盾以及减轻环境污染压