本研究以家蚕品种932、湘晖和大造为材料,采用生物信息学、荧光定量PCR、Western Blot、酵母双杂交等方法,筛选与蚕卵滞育或滞育解除相关联的蛋白,分析BmSTAT在产后即时浸酸卵、产后第3 d浸酸卵、滞育卵、非滞育卵中的转录表达情况和在细胞分裂周期中的调控作用,目的是为了探索家蚕滞育及滞育解除的分子机制,得到如下结果:(1)根据shotgun检测到的932品种第3 d浸酸卵、滞育卵、非滞育卵的蛋白质数据,通过归类对比,得到产后第1 d与第3 d滞育卵均存在相同的蛋白有162种,能注释到的蛋白有123种;产后第1 d与第3 d非滞育卵均存在相同的蛋白有224种,能注释到的蛋白有187种;比对产后第3 d浸酸卵的蛋白与产后第1 d和第3 d的滞育卵、非滞育卵的蛋白差异,结果发现第3 d浸酸卵中的特有蛋白有154种,能注释到的蛋白有117种。经GO分类,这些蛋白主要定位于细胞和细胞器中,在分子功能分类中,大部分蛋白具有结合和催化活性,参与的生物学过程主要有细胞过程与代谢过程。并从中筛选了一个与家蚕卵滞育关联密切的BmSTAT蛋白,对其进行了基因的克隆与表达分析。(2)运用分子生物学的技术方法,克隆了BmSTAT基因。采用荧光定量PCR技术,检测了932品种产后第3 d浸酸卵与对照滞育卵中的BmSTAT表达情况,蚕卵经浸酸处理后的1~4 d变化不大,表达量值在0.1~1之间,到5~8 d时,表达量则逐渐下降,到第8 d时降至最低,量值为0.042。而对照滞育卵,产后3~10 d的BmSTAT基因表达量较平稳,量值在0.40~3.92之间。湘晖品种的即时浸酸卵,BmSTAT基因的表达量于浸酸后第2 d明显下调,比浸酸后2 h的量值下降了99.9%,直至蚕卵转青期,其表达量在0.1以下;而滞育卵中的表达量则在0.96~5.4的水平,比浸酸处理卵的高。大造品种所产的非滞育卵,从产后至转青阶段,BmSTAT基因的表达量在0.003以下,处于低水平的表达状态。从滞育卵、浸酸卵、非滞育卵的BmSTAT表达变化来看,蚕卵发育后,BmSTAT的表达量是下调的。(3)对932品种的第3 d浸酸卵和滞育卵中的BmSTAT进行Western Blot检测,结果显示位于80 kDa和160 kDa处均有条带出现,推测分别为BmSTAT的单体和二聚体。根据条带面积计算出的数值结果表明,BmSTAT单体的相对表达量于浸酸后的第2 d逐渐上升,到第4 d时最大,量值为1422596,随后下降,到第8 d为964276;BmSTAT二聚体的相对表达量,浸酸后也逐渐下降。总体上,浸酸卵一经发育,BmSTAT单体和二聚体的相对表达量均低于非浸酸卵的滞育卵。(4)通过酵母双杂交的方法检测BmSTAT和CyclinB的相互作用,结果表明BmSTAT和CyclinB可以相互作用形成复合体,推测BmSTAT会影响CyclinB在细胞周期中的作用进而影响到细胞分裂周期进程。