【摘 要】
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本文从大鼠骨髓中分离出单个核细胞,密度梯度离心后,贴壁培养和扩增,用流式细胞仪对第6代细胞进行CD29、CD106、CD45和CD34抗原检测以证实为MSCs。用二甲基亚砜(dimethyl sulf
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本文从大鼠骨髓中分离出单个核细胞,密度梯度离心后,贴壁培养和扩增,用流式细胞仪对第6代细胞进行CD29、CD106、CD45和CD34抗原检测以证实为MSCs。用二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)和叔丁基对羟基茴香醚(butylated hydroxyanisole,BHA)在体外对MSCs进行诱导分化,然后用免疫细胞化学法检测MSCs神经细胞特异性标志物的表达,鉴定诱导后的细胞分化类型,并观察其变化规律。采用脂质体转染法,将外源性bFGF转入MSCs中,并用RT-PCR、免疫细胞化学和Western blot方法检测bFGF在转染后的MSCs中的分泌表达情况。最后,将MSCs和bFGF基因修饰的MSCs(MSCs-bFGF)通过静脉移植至实验性脑缺血大鼠体内,观察比较两者对大鼠脑缺血后神经功能及脑梗死体积的影响,并应用免疫组化、双重荧光标记方法观察MSCs在脑内迁移和分化情况。经实验得出结论:1.MSCs在体内外均能分化为神经细胞;2.MSCs移植对脑缺血具有保护作用;3.b-FGF基因修饰可提高MSCs移植对大鼠脑缺血后损伤的保护作用和神经功能恢复的促进作用,其作用可能与增加移植后MSCs存活率,并提高MSCs向神经元的分化率有关。
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