论文部分内容阅读
背景与目的原发性胆囊癌(primary carcinoma of the gallbladder,PCG)是胆道系统常见的恶性肿瘤，近年来发病率有逐年上升趋势。研究表明，膜联蛋白A1（AnnexinA1,ANXA1）在多种恶性肿瘤中呈高表达，并与肿瘤细胞增殖、失巢凋亡、侵袭转移等恶性生物学行为有关。而P19蛋白是一种抑癌基因，能特异性抑制G1CDK4/6的激酶活性，阻止细胞由G1期向S期的转变，与细胞周期调控、增殖、凋亡、迁移、侵袭转移及血管生成等密切相关。检测ANXA1、P19基因在胆囊癌组织、胆囊良性组织中的表达情况，并探讨其与胆囊癌的发生发展及胆囊癌临床病理参数之间的关系。为进一步研究和探讨胆囊癌发生发展的相关基因，找寻对其有效的诊断和治疗方法，具有一定的临床价值和理论意义。方法1.收集2006年1月至2011年7月期间宁夏医科大学总医院肝胆外科行手术治疗且临床、病理及随访资料完整的56例胆囊癌患者石蜡标本，另收集同期因结石性胆囊炎或慢性胆囊炎等胆囊良性疾病行胆囊切除标本56例。采用免疫组化S-P法检测ANXA1及P19蛋白的表达，实验结果用SPSS11.5统计软件分析处理，样本率的比较用四格表或行×列表的卡方检验，二因子相关性用pearson相关分析。2.采用Western-blot法定量分析30例胆囊癌组织及30例非肿瘤胆囊组织中ANXA1, P19蛋白的表达，分析的结果以x士s表示，组间比较用SPSS11.5统计软件行t检验。结果1.免疫组化S-P法检测56例胆囊癌组织及56例胆囊良性组织ANXA1的阳性表达率分别为69.64%(39/56),12.50%（7/56), Pl9阳性表达率分别为25.00%(14/56),83.93%(47/56),经卡方检验均有统计学差异；ANXA1及P19的表达高低与胆囊癌病人的性别、年龄、肿瘤大小及黄疽指数无明显关系，而与肿瘤的病理分级、临床TNM分期及淋巴结转移相关；ANXA1及P19蛋白在胆囊癌中的表达呈负相关（r=-0.336）。2.Western-blot法定量分析30例胆囊癌组织标本及30例胆囊良性组织标本中ANXA1蛋白灰度扫描与内参照β-actin蛋白灰度扫描相对比值平均值分别为0.7442±0.0528,0.1570±0.0326，二组数据经t检验有统计学差异;两组织中P19蛋白灰度扫描与内参照β-actin蛋白灰度扫描相对比值平均值分别为0.0976±0.0299,0.7299±0.0874，二组数据经t检验有统计学差异。结论1.ANXA1在PCG组织的阳性表达率越高，则肿瘤的恶性程度越高，患者预后相对较差，生存期较短。2.P19蛋白在PCG组织中的表达缺失率越高，则肿瘤的恶性程度越高，患者的预后越差，生存期越短。3.ANXA1、P19蛋白在PCG组织中表达有明显差异，其阳性表达率与肿瘤的病理分级、临床TNM分期、淋巴结转移密切相关，可作为判断PCG临床病理发展的参考指标之一。4. ANXA1及P19蛋白的表达情况均为影响胆囊癌患者预后的独立因素，且二者之间的表达呈负相关，联合检测ANXA1及P19蛋白可望成为PCG早期诊断及预后判断的重要参考指标之一。