胶原凝胶及壳聚糖基因载体的制备

来源 :长春理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:justinviva
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本文为载基因的壳聚糖胶原凝胶基因治疗提供了前期准备工作。选用酶消化法,以牛腱为原料提取胶原,保证提取的胶原具有三股螺旋结构。并对提取的胶原进行的相应的表征工作。测定了胶原提取液的粘度和固体含量。研究了胃蛋白酶消化法中酶与材料的最佳配比为E:B=1:10。经红外、紫外光谱分析确定提取物为胶原。同时用提取的胶原制备胶原凝胶,测定胶原凝胶中固体含量。在胶原凝胶中培养细胞,用光学显微镜进行观察细胞生长状态,证明胶原凝胶可以作为细胞生长的立体三维生长支架。另外,对天然的壳聚糖进行了一系列生物学表征工作,凝胶阻滞电泳实验证明壳聚糖具有一定的DNA结合能力。粒径电位分析表明壳聚糖与DNA形成了粒径在100-300nm,表面电位稳定的纳米复合物颗粒。MTT实验测试了壳聚糖的没有细胞毒性。证明了壳聚糖可以作为基因载体。
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