论文部分内容阅读
目的：探讨沉默Dock180对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和生存力的影响及其机制。方法：分别用空白试剂、阴性慢病毒、Dock180RNAi慢病毒（沉默Dock180mRNA）感染H9C2心肌细胞，并进行缺氧/复氧（H/R）干预。实验分为空白组，阴性病毒组，Dock180沉默组，空白+H/R组，阴性病毒+H/R组，Dock180沉默+H/R组。RT-PCR法检测心肌细胞的Dock180mRNA的表达；蛋白质印迹分析法检测心肌细胞Dock180蛋白和p-ERK1/2蛋白表达；MTT法检测心肌细胞的增殖率；流式细胞术(FCM)检测心肌细胞的凋亡率；共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）观察心肌细胞骨架变化。结果：Dock180沉默组较空白组和阴性病毒组，Dock180沉默+H/R组较空白+H/R组和阴性病毒+H/R组Dock180mRNA、Dock180蛋白、p-ERK1蛋白、p-ERK2蛋白、增殖率均出现降低（P＜0.01)，凋亡率均增加(P＜0.01，P＜0.05)，细胞骨架更紊乱。结论：沉默Dock180能加重缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡增加和生存力降低。该过程可能是通过p-ERK1/2蛋白表达降低介导的。