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在肿瘤的临床治疗中，ABC家族转运蛋白介导的肿瘤多药耐药是恶性肿瘤患者化疗失败的主要原因。一直以来，通过抑制ABC家族转运蛋白逆转肿瘤多药耐药被认为是克服肿瘤耐药最有效的办法。目前，第三代逆转剂已进入临床研究阶段，但是在药效和毒性方面仍然面临巨大的挑战。迄今为止，还没有耐药逆转剂上市。天然化合物结构新颖、种类繁多，从中寻找和开发高效、低毒的新型耐药逆转剂药物先导物是目前肿瘤多药耐药逆转剂研究的热点。升麻醇（acerinol）是从传统中药小升麻(Cimicifuga acerina)中分离得到的菠萝蜜烷型三萜化合物，尚未见升麻醇在抗肿瘤活性方面的报道。本课题主要对升麻醇进行耐药逆转活性评价及其作用机制研究，为天然来源的新型肿瘤多药耐药逆转剂研究开发提供科学依据。研究目的：对升麻醇的肿瘤多药耐药逆转活性进行评价，并对其作用机制进行深入研究，为升麻醇发展成为靶点清楚、机制明确的新型肿瘤多药耐药逆转剂提供科学依据。研究方法：（1）升麻醇多药耐药逆转活性评价：①采用MTT法评价升麻醇对HepG2、MCF-7及相应的耐药性HepG2/ADM和MCF-7/ADR细胞的增殖抑制作用。②MTT法评价升麻醇肿瘤多药耐药逆转活性。③使用P450-GloTMscreeningsystems试剂盒检测升麻醇对CYP3A4酶活性的影响。（2）升麻醇逆转肿瘤多药耐药机制研究：①采用MTT法检测升麻醇对顺铂在肿瘤细胞上的毒性影响。②使用流式细胞术检测升麻醇对多柔比星在细胞中累积的影响。③使用流式细胞术检测升麻醇对罗丹明-123在细胞中累积的影响。④采用RT-PCR法检测升麻醇对HepG2/ADM和MCF-7/ADR细胞ABCB1mRNA的影响。⑤采用Western blot法检测升麻醇对ABCB1蛋白表达水平影响。⑥采用Western blot和MTT法检测ABCB1siRNA干扰对升麻醇逆转作用的影响。⑦使用Pgp-GloTMATPase试剂盒检测升麻醇对ABCB1ATPase活性的影响。⑧采用MTT法评价升麻醇逆转作用的持续性。⑨应用Docking分析方法模拟升麻醇和维拉帕米与ABCB1分子对接。研究结果：（1）升麻醇多药耐药逆转活性评价：①升麻醇（4μM）对HepG2、HepG2/ADM、MCF-7及MCF-7/ADR细胞均没有毒性，选用4μM和2μM作为研究浓度。②升麻醇可显著提高多柔比星、长春新碱和紫杉醇对HepG2/ADM和MCF-7/ADR细胞的敏感度，且不影响抗肿瘤药物在HepG2和MCF-7上的毒性。③升麻醇对CYP3A4酶活性只有轻微影响。（2）升麻醇逆转肿瘤多药耐药作用机制研究：①升麻醇对非ABCB1底物顺铂无明显影响。②升麻醇可促进抗肿瘤药物多柔比星在HepG2/ADM和MCF-7/ADR上的累积。③升麻醇显著促进ABCB1特异性底物罗丹明-123在耐药细胞中的累积。④升麻醇对ABCB1在mRNA和蛋白表达水平无明显影响。⑤ABCB1siRNA干扰显著降低升麻醇的耐药逆转作用。⑥升麻醇可显著提高ABCB1ATPase活性。⑦升麻醇的耐药逆转作用没有持续性。⑧升麻醇和ABCB1的结合位点与维拉帕米部分重叠。研究结论：升麻醇可显著逆转ABCB1介导的HepG2/ADM和MCF-7/ADR细胞的多药耐药性，机制研究发现升麻醇可促进药物在耐药细胞内的累积，且不影响ABCB1的表达，可激活ABCB1ATPase活性，竞争性抑制ABCB1泵出功能。