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目的:探讨乙型肝炎、乙肝后肝硬化和肝癌患者外周血淋巴细胞Fas抗原的表达及血清中可溶性Fas(sFas)的水平以及其他肝纤维化等指标在乙型肝炎后肝硬化、肝癌病情进程中的作用及意义。
方法:(1)选择临床确诊的慢性乙型肝炎患者20例;乙肝后肝硬化28例;HBV相关性肝癌20例;健康对照组20例。
(2)提取患者外周血单个核细胞,应用流式细胞术检测Fas抗原;采用ELISA双抗体夹心法检测血清中sFas的水平。
(3)采用ELISA双抗体夹心法检测患者和正常对照组血清中TGF-β1的水平。
(4)采用放射免疫分析法检测患者血清肝纤维化指标透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(IVC)。
(5)采用荧光实时定量PCR法检测了60例患者血清HBV-DNA的含量。
结果:20例慢性乙型肝炎患者、28例乙型肝炎后肝硬化和20例乙型肝炎后肝癌患者,对照组20例。
(1)外周血淋巴细胞Fas表达分别为(49.6±10.8)%,(43.0±9.1)%,(70.4±7.02)%,其中肝癌组外周血淋巴细胞Fas表达明显高于对照组(59.9±4.02)%,p<0.05;而慢性乙型肝炎和乙型肝炎后肝硬化组均明显低于对照组,p<0.05。
(2)血清sFas水平分别为(2.06±0.98)、(3.18±1.60)、(2.23±1.12)μg/L,明显高于对照组(1.11±0.49)μg/L,P<0.05。血清TGF-β1水平分别为(0.66±0.32)、(0.82±0.48)、(1.09±0.62)μg/L明显高于对照组(0.32±0.21)μg/L,P<0.05。
(3)肝纤维化指标的水平,其中血清HA水平分别为(135.1±129.9)μg/L、(624.7±279.1)μg/L、(401.5±305.9)μg/L和(82.1±20.6)μg/L;血清PCⅢ水平分别为(124.3±62.1)μg/L、(190.7±62.0)μg/L、(191.3±70.9)μg/L和(92.4±18.8)μg/L;血清IVC水平分别为(59.3±30.4)μg/L、(113.0±42.8)μg/L、(139.1±29.7)μg/L和(57.3±6.2)μg/L。与对照组比较,在乙肝后肝硬化和肝癌患者血清中HA、PCⅢ和IVC明显高于对照组(P<0.05)。
(4)对60例患者以HBV-DNA定量检测的含量进行分组分析,发现不同HBV-DNA复制水平的患者血清sFas和TGF-β1的水平无明显差异。
结论:乙型肝炎后肝硬化、肝癌患者血清中sFas和TGF-β1水平随着肝硬化、肝癌病情的进展,结果明显升高,并与肝纤维化指标有着密切的关系。
外周血淋巴细胞Fas的表达在肝癌组明显升高,而在慢性乙型肝炎、肝硬化组明显下降。综上所述,乙型肝炎后肝硬化、肝癌的发生和发展是多因素综合作用的结果,与细胞凋亡、肝纤维化、细胞因子含量的变化均有一定的关系。