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目的:1.从一批新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物中筛选获得有抗肿瘤活性的药物。2.探讨筛选获得的新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物抗肿瘤作用的机理。方法:1.MTT法筛选60种新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物的体外抗肿瘤活性,并对初筛有活性的化合物LA23-30和C1抗细胞增殖作用进行进一步的检测。2.克隆形成实验检测新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物LA23-30和C1对宫颈癌细胞He La增殖的影响。3.检测乳酸脱氢酶活性进一步观察新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物LA23-30和C1对宫颈癌细胞He La增殖的影响。4.使用Caspase抑制剂Z-VAD-FMK观察新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物LA23-30或C1是否通过细胞凋亡抑制细胞增殖。5.蛋白免疫印迹法和细胞免疫荧光法检测新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物LA23-30或C1对肿瘤细胞自噬相关蛋白LC3B表达的影响。6.Ad-m Cherry-GFP-LC3B双荧光腺病毒感染He La细胞后,荧光显微镜观察化合物LA23-30或C1处理He La细胞后对自噬流的影响。7.细胞免疫荧光法双标LC3B蛋白和Lamp1蛋白并分析其共定位情况,观察化合物LA23-30或C1对He La细胞自噬体与溶酶体融合的影响。8.观察溶酶体红色荧光探针Lyso-Tracker Red与溶酶体标志蛋白Lamp1蛋白共定位情况表明化合物LA23-30或C1对He La细胞溶酶体酸性环境的影响。9.蛋白免疫印迹法观察化合物C1处理对He La细胞自噬相关蛋白Rab7表达的影响。10.通过荧光显微镜观察LC3B蛋白和Rab7蛋白共定位情况进一步表明化合物C1处理对He La细胞自噬相关蛋白Rab7表达的影响。11.裸鼠背部右前肢腋下部位皮下注射He La细胞悬液来建立荷瘤模型。12.检测荷瘤裸鼠肿瘤的大小及体积,观察化合物LA23-30对体内肿瘤的影响。13.免疫组织化学法检测新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物LA23-30对肿瘤组织中自噬相关蛋白LC3B表达的影响。14.各组裸鼠心、肝、脾、肺、肾、胃等固定、包埋、切片,HE染色法观察化合物LA23-30处理对各组织生理结构的影响。结果:1.通过筛选发现新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物LA23-30和C1对多种肿瘤细胞增殖具有明显的抑制作用且呈现浓度依赖性。2.新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物LA23-30治疗荷瘤裸鼠后能够抑制其体内肿瘤的生长。3.与LA23-30+Caspase抑制剂Z-VAD-FMK组相比,化合物LA23-30对肿瘤细胞凋亡无明显的影响;与C1+Caspase抑制剂Z-VAD-FMK组相比,化合物C1对肿瘤细胞凋亡有轻微影响。4.新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物LA23-30和C1能诱导He La细胞自噬增加(自噬体显著增多和LCBⅡ/Ⅰ上升)。5.新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物LA23-30对He La细胞自噬流没有影响;化合物C1则导致自噬体和/或自噬溶酶体堆积,出现自噬流阻滞。6.自噬标志性蛋白LC3B和溶酶体标志性蛋白Lamp1免疫荧光共定位分析显示化合物C1抑制He La细胞自噬过程中的自噬体与溶酶体融合,而化合物LA23-30对自噬体与溶酶体融合没有影响。7.溶酶体荧光探针Lyso-Tracker Red与溶酶体Lamp1蛋白共定位分析表明化合物LA23-30和C1都不改变He La细胞溶酶体酸性环境。8.化合物C1诱导He La细胞自噬体与溶酶体融合相关蛋白Rab7下调,同时也阻止Rab7被招募至自噬体上。9.化合物LA23-30治疗后的裸鼠荷瘤组织中自噬标记蛋白LC3B的表达显著上调。10.新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物LA23-30处理后裸鼠心、肝、脾、肺、肾、胃等组织无病变现象。结论:1.筛选获得新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物LA23-30和C1对肿瘤细胞有显著的抑制作用。化合物LA23-30对体内肿瘤生长也有较强抑制作用。2.新型咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物LA23-30通过促进细胞自噬诱导肿瘤细胞死亡;而化合物C1则通过下调自噬体与溶酶体融合相关蛋白Rab7并阻止其被招募至自噬体,从而引发自噬体和溶酶体融合障碍,导致自噬流阻滞自噬体堆积而死亡。