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目的： 1、探讨超排、体外受精、体外成熟对囊胚全基因组DNA甲基化水平的影响； 2、探讨ART对胚胎印记基因Igf2和Grb10的mRNA表达水平的影响； 3、探讨ART对印记基因Grb10的CGI1（CpG island，CGIs）甲基化水平的影响； 4、从表观遗传角度探讨ART应用的安全性，为阐述ART子代出现疾病的发病机制提供依据。 方法：正常受孕的胚胎为对照组，超排胚胎、体外受精（IVF）胚胎、体外成熟（IVM）胚胎为实验组。采用胚胎免疫荧光法观察以上四组胚胎在囊胚期DNA甲基化水平；选择合适的“相对标准品”，系列稀释后构建相对标准曲线，运用实时荧光定量PCR检测单个囊胚的印记基因Igf2和Grb10的mRNA表达水平；采用亚硫酸氢盐修饰后测序的方法检测以上四组胚胎印记基因Grb10的CGI1甲基化程度。收集以上四组实验数据，采用均数±标准差、单因素方差分析、Dunnett t检验等进行统计学分析。 结果：胚胎免疫荧光检测结果显示：IVF组的DNA甲基化强度比体内组、IVM组增高（P＜0.05），而IVF组与超排组间相比较无显著性差异（P＞0.05）。DNA甲基化强度在体内组、超排组、IVM组间均无显著性差异（P＞0.05）；实时荧光定量PCR检测结果显示：超排组和IVM组的Igf2表达水平均较体内组和IVF组增高（P＜0.05），而超排组与IVM组，IVF组与体内组间相比较，Igf2的表达水平均无显著性差异（P＞0.05）；超排组和IVF组的Grb10表达水平较体内组降低（P＜0.05），而超排组与IVF组间的Grb10表达水平无显著性差异（P＜0.05），Grb10在超排组、IVF组、IVM组间的表达水平均无显著性差异（P＞0.05）。基于亚硫酸氢盐修饰后测序结果显示：IVF组的Grb10 CGI1甲基化强度比体内组和IVM组增高（P＜0.05），而IVF组与超排组相比较无显著性差异（P＞0.05）。Grb10 CGI1甲基化强度在超排组、IVM组、体内组间均无显著性差异（P＞0.05）。 结论：ART增高DNA甲基化强度在IVF组最明显，这可能与ART操作过程使用的外源性激素HCG有关；超排和IVF对Igf2表达起着相反作用；IVF组和超排组的Grb10表达水平降低，这与ART操作过程引起其CGI1甲基化强度的增高有关；ART会引起表观遗传修饰的异常。