全肠内营养对炎症性肠病大鼠Th17细胞表达影响的研究

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Water_E
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目的:通过观察全肠内营养(Exclusive enteral nutrition,EEN)制剂对炎症性肠病(Inflammatory bowel diseases,IBD)幼年大鼠辅助性T细胞17(T hellp 17 cell,Th17)相关白细胞介素-17A(Interleukin-17A,IL-17A)水平的影响,探讨EEN对Th17细胞的调节作用,进而揭示EEN对儿童IBD治疗的部分作用机制。研究方法:将40只雄性Sprague-Dswley(SD)幼年大鼠,随机分为:空白对照组、EEN对照组、IBD组、EEN治疗组(EEN-IBD组)。IBD组大鼠予以2,4,6一三硝基苯磺酸(2,4,6 trinitrobenzenesulfonic acid-ethanol,TNBS)-乙醇溶液灌肠造模,空白对照组予生理盐水(Normal saline,NS)灌肠,之后两组均予普通饲料喂养7天。EEN-IBD组予TNBS-乙醇溶液灌肠造模,EEN组大鼠予NS灌肠,之后两组予肠内营养制剂百普力喂养7天。每天记录大鼠的体重、一般状态、粪便及便隐血情况,计算疾病活动指数(Disease activity index,DAI)评分。干预1周后处死大鼠,留取大鼠血清及结肠组织,苏木素-伊红(Hematoxylin Eosin,HE)染色观察肠壁及粘膜病理情况,ELISA法检测血清中IL-17A表达情况、Western blot、real time-PCR(RT-PCR)检测肠组织中IL-17A的表达情况。结果:(1)一般情况:IBD组及EEN-IBD组于造模后立即出现腹泻,血便,而后出现进食减少,体重减轻,精神不振,鼠毛稀松脏乱,在肠内营养治疗5天后,EEN-IBD组在腹泻及便血方面显著减轻;另外两对照组大鼠正常进食,鼠毛整洁,排墨绿色或黄色成型大便,便隐血阴性。(2)体重方面:实验第7天,IBD组与EEN-IBD组的体重增长率无显著差异(P≥0.05);EEN组体重增长率(51.29±3.61)%小于空白对照组(60.17±9.32)%(P<0.05),差异有统计学意义。(3)DAI评分:IBD组与EEN-IBD组DAI呈下降趋势,第7天IBD组评分(0.27±0.21)明显高于EEN-IBD组(0.03±0.11)(P<0.05),差异有统计学意义;EEN组与空白对照组评分为0分。(4)组织大体与病理:IBD组大鼠组织大体显示肠壁充血水肿、溃疡等炎症改变,镜下病理可见肠上皮结构破坏,腺体减少,黏膜下层大量炎细胞浸润;而EEN-IBD组肠道粘膜轻度充血水肿,腺体结构轻度紊乱,炎细胞浸润减少;另外两对照组未见明显异常。(5)IL-17A表达情况:实验第7天,IBD组血清及肠组织IL-17A表达量明显高于EEN-IBD组及空白对照组(P<0.05),差异有显著统计学意义。EEN-IBD组与另两对照组相比(P≥0.05),无显著性差异。结论:EEN可有效缓解IBD幼年大鼠肠道免疫炎症反应,其作用机制之一可能是通过调节Th17细胞,并主要降低肠粘膜中细胞因子IL-17A的表达,进而减少相关炎症因子的聚集和浸润来发挥作用。
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