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试验以羊草种子为研究对象,利用人工加速老化方法,通过人为模拟劣变过程,研究劣变与种子膜结构与透性变化的关系,并进一步探索羊草种子劣变机理,为降低种子劣变发生提供了理论依据。
试验通过设计不同的温度和时间组合,研究不同老化条件下处理对两种羊草种子发芽率的影响。结果表明在46℃下人工加速老化处理72小时可以作为休眠性弱的或高发芽率的羊草种子的活力测定方法。
按上述的人工加速老化方法,在46℃下对另一羊草种子进行劣变处理,研究表明劣变导致种子发芽率、发芽势和活力指数降低。老化初期有一持续期,发芽率降低的速度很慢,但种子的发芽势,活力指数,且发芽势和活力指数与发芽率则呈极显著相关(P<0.01),因此,发芽势和活力指数是评定羊草种子质量的很好指标。
通过测定种子浸出液的电导率和可溶性糖的结果表明,随着种子劣变加深,种子浸出液的电导率和可溶性糖含量升高,表明膜透性增强。羊草种子浸出液的电导率与劣变程度不相关,因此,电导率不适合作为评价羊草种子质量的指标。相反,可溶性糖泄露与种子劣变程度呈显著性正相关,因此,可溶性糖含量也是评定羊草种子的很好指标。
SOD酶活性与劣变程度呈显著性负相关,SOD酶对体内氧自由基清除能力显著降低。对种子活性氧总含量测定表明,在劣变初期活性氧含量逐渐升高,脂质过氧化作用在逐步加强,但随着劣变程度的加深,活性氧总量则开始表现出与种子劣变程度不相关,其原因可能是活性氧本身是由许多氧自由基组成,不同种类的氧自由基在脂质过氧化反应中的作用不同,因此活性氧总量的测定掩盖了个别关键氧自由基对细胞的伤害作用,无法表现出自由基的脂质过氧化反应程度。
在透射电镜下观测,劣变的羊草种胚细胞膜结构受损,首先表现在线粒体膨胀、膜破损及解体,质膜发生质壁分离并出现破损现象。随着劣变程度加剧,核膜开始破损,核质与细胞质混合,细胞器解体,最终细胞死亡。
试验表明,劣变的羊草种子膜结构受损使膜透性增强并与劣变程度密切相关。羊草种子劣变过程中脂质过氧化作用的终产物MDA含量逐渐升高,但与发芽率不相关,却与活力指数呈显著性负相关(P<0.05),表明由活性氧自由基引起的脂质过氧化作用是羊草种子劣变主要因素。