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目的:本实验应用MTT法及流式细胞仪,深入研究大蒜素对肿瘤细胞的抑制作用以及对肿瘤细胞周期的影响。并通过免疫组化等技术,检测在G2/M期调控中起重要作用的cyclinB蛋白和cdc2蛋白的表达水平,探讨大蒜素对肿瘤细胞周期阻滞的作用机理。
方法:将人胃癌转移淋巴结细胞系SGC-7901、人胃低分化腺癌细胞系BGC-823两种肿瘤细胞在培养箱中培养,取对数生长期细胞用于实验。用MTT法测定细胞增殖抑制率及药物的IC50:以大蒜素浓度为横坐标,以细胞抑制率为纵坐标,绘制细胞增殖抑制曲线,并测定药物半数抑制浓度(IC50)。通过流式细胞仪检测IC50浓度的大蒜素对人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-823细胞周期的影响。应用免疫组化染色检测cyclinB和cdc2蛋白表达:培养细胞分别加入MTF法测得的72hIC50浓度大蒜素,作用24h后收集细胞。
结论:通过流式细胞仪的检测,IC50浓度的大蒜素使人胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823停滞于G2/M期。应用免疫组化染色检测SGC-7901和BGC-823两种细胞cdc2和cyclinB蛋白表达,未经大蒜素处理的两种细胞,cdc2和cyclinB蛋白表达均为阳性表达,大蒜素处理后,cdc2和cyclinB蛋白表达下降。