拉曼光谱技术在肿瘤鉴别与异物定性中的应用研究

来源 :济南大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:xytim021
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目的结合拉曼光谱技术在生物医学中的应用情况,本实验拟应用拉曼光谱技术鉴别课题组迪夫染色的循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells,CTCs)与外周血淋巴细胞;鉴别瑞氏-姬姆萨染色的肿瘤细胞与正常细胞;鉴别肝癌细胞系与外周血淋巴细胞;鉴别肝癌癌组织与合并肝硬化肝组织以及鉴定膈肌异物。方法本文运用拉曼光谱技术在细胞层面分析了迪夫染液样本中CTCs、CTCs旁淋巴细胞及样本中滤膜、染料、玻片等的拉曼光谱;瑞氏-姬姆萨染色样本中的肿瘤细胞与正常细胞的拉曼光谱;肝癌细胞系与正常人外周血白细胞的拉曼光谱。在组织层面分析了30例肝癌手术患者的肝癌癌组织与合并肝硬化肝组织的拉曼光谱。在临床案例中分析了肿物中异物的拉曼光谱。结果通过分析各样本拉曼光谱,结果显示:1)在细胞层面,532 nm波长激光下经迪夫染色的CTCs、淋巴细胞及染料的拉曼光谱在209~213 cm-1、273~278 cm-1、336~338 cm-1等峰位处都有类似特征峰;785 nm波长激光下经迪夫染色的肿瘤细胞、滤膜与玻片的拉曼光谱在1200~2000 cm-1区域都存在高耸的荧光峰,在1200 cm-1以前区域,631~632cm-1、701~702 cm-1、883~887 cm-1、1106~1107 cm-1处鼻咽癌细胞与滤膜有拉曼特征峰,而空白玻片呈光滑曲线。在532nm波长激光下经瑞氏-姬姆萨染色的肿瘤细胞与淋巴细胞在208~215 cm-1、278~285 cm-1、336~341 cm-1等峰位附近都有类似特征峰而染料由于染色较浅除在峰位640~643 cm-1、708~713 cm-1、1500~1505 cm-1、1620~1624cm-1处拉曼特征峰峰强较高外,其余峰强均较低。白细胞与细胞周围基底的拉曼光谱曲线平缓,没有显著的特征峰;而肝癌细胞在峰位1003 cm-1、1449 cm-1、1666 cm-1附近可见显著特征峰。2)组织层面,从肝癌癌组织与合并肝硬化肝组织的拉曼光谱对比图可以看出:在峰位1004 cm-1、1155 cm-1、1510 cm-1附近合并肝硬化肝组织的峰强高于肝癌癌组织;在峰位1642 cm-1附近合并肝硬化肝组织的峰强低于肝癌癌组织;在1377 cm-1和1586 cm-1附近肝癌癌组织有显著特征峰而合并肝硬化的肝组织没有。3)在临床案例中,从膈肌异物、中人氟安及氟尿嘧啶注射液的拉曼光谱可以看出在412cm-1、687 cm-1、1344 cm-1、1538 cm-1、2876 cm-1等处都有明显特征峰且高度大致相同。结论通过拉曼光谱技术分析迪夫染色样本与瑞氏-姬姆萨染色样本的拉曼光谱可见通过染色后的样本由于染料等因素的干扰用拉曼光谱技术是无法鉴别的,通过对未染色样本肝癌细胞系与人外周血淋巴细胞拉曼光谱的分析可见运用拉曼光谱技术鉴别肿瘤细胞与淋巴细胞是可行的。通过对30例肝癌癌组织与合并肝硬化肝组织拉曼光谱的对比可以看出,运用拉曼光谱技术鉴别肝癌癌组织与合并肝硬化的肝组织是可行的。通过拉曼光谱对临床工作中异物性质的确定,为我们临床工作对异物的鉴定提供了一种新手段。
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