三种海藻凝集素的分离、纯化及其部分性质的研究

来源 :大连水产学院 大连海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zanyunfeng
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蜈蚣藻(Grateloupia filicima)、海萝(Gloiopeltis furcata)、肠浒苔(Entromorphaintestinalis)3种海藻分别经PBS缓冲液(0.015mol/LNa<,2>HPO<,4>-NaH<,2>PO<,4>,pH7.2)抽提、硫酸铵分级、透析、DEAE-52纤维素离子交换层析和SephadexG-200分子筛层析,从中纯化出蜈蚣藻凝集素(GFL)、海萝凝集素(GFL)、肠浒苔凝集素(EIL).3种凝集素在PAGE上分别显示单一蛋白染色带,在等电聚焦电泳上也分别显示单一蛋白染色带,其等电点分别为9.4、9.0、8.9.用SephadexG-200分子筛层析测得其分子量分别为6310、8318、17783.在对兔、鲤、鲫、人血型红细胞及单胞藻的凝集实验中,除海萝凝集素对人血型红细胞无凝集活性外,其余均表现出一定程度的凝集活性.3种凝集素凝集兔红细胞的抑制实验中,被实验的5种糖(葡萄糖、乳糖、D-半乳糖,D-甘露糖,蔗糖)中仅D-甘露糖对海萝凝集素表现出抑制作用,最小抑制浓度为0.5M.牛甲状腺球蛋白、鸡卵白蛋白、γ-球蛋白对海萝凝集素和蜈蚣藻凝集素均表现出一定程度的抑制作用,对肠浒苔凝集素则不具有抑制作用.3种海藻凝集素在pH4.0-10.2范围内均有活性,但在pH6.9-8.0范围内活性较高.3种凝集素在100℃加热1h,活力均未减弱,这说明这3种凝集素具有很强的耐热性.
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