【摘 要】
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该论文利用转基因方法对扩张蛋白AtEXP1在气孔运动中的功能加以分析研究.通过RT-PCR技术,从拟南芥成熟叶片中克隆出AtEXP1 cDNA全长,构建重组表达载体PBI121-AtEXP1,叶盘法转
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该论文利用转基因方法对扩张蛋白AtEXP1在气孔运动中的功能加以分析研究.通过RT-PCR技术,从拟南芥成熟叶片中克隆出AtEXP1 cDNA全长,构建重组表达载体PBI121-AtEXP1,叶盘法转化烟草.基因组PCR和Southern blot结果表明AtEXP1基因已整合进烟草基因组中,且是多拷贝的;Western blot结果显示转基因烟草中扩张蛋白的表达量明显增强.以34号转基因烟草株系作为继续实验的材料,实验过程中发现转基因烟草幼苗的根系生长更为旺盛,不定根数目明显多于野生型;但整个生长过程中,转基因与野生型烟草地上部分的形态发育并无明显差异.为阐明扩张蛋白AtEXP1在气孔运动过程中的作用,我们分析了不同刺激因子对转基因烟草气孔运动变化的影响.表皮条的生物学分析表明,AtEXP1过量表达促进了光和K<+>诱导的气孔开放,以及Ca<2+>、ABA和黑暗诱导的气孔关闭过程,说明扩张蛋白AtEXP1以与了烟草气孔运动的调控.统计结果表明转基因和野生型烟草叶片的气孔密度差异不大.充足光照、水分供应条件下,转基因烟草的光合与蒸腾速率明显高于野生型植株.此外,成熟转基因烟草的抗旱性也高于野生型,这些结果进一步说明AtEXP1的过量表达提高了气孔的灵敏度.综合所有实验结果,扩张蛋白AtEXP1可能通过提高气孔对环境刺激应答的灵敏性,在气孔运动中发挥了积极的调控作用.
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