黑线仓鼠（Cricetulus barabensis）是我国北方农田的优势害鼠之一，以其分布广，繁殖力强，种群数量大，给人们的农业生产和日常生活带来严重危害。受温度、光照、食物等多种因素的影响，黑线仓鼠的繁殖行为存在季节性，每年的春季和秋季是其种群数量增长的高峰期。雌激素是主要的性激素，通过与其受体的结合调控动物的繁殖，但具体调控的分子机制尚不清楚。雌激素受体（Etrogen receptor，ESR）是核受体超家族的一员，分为两个亚型ESRα和ESRβ。ESRs不仅参与动物下丘脑-垂体-性腺轴的繁殖活动调控，而且参与和繁殖密切相关的脂肪代谢、血糖代谢、摄食等能量代谢及机体的应激反应。本研究通过检测黑线仓鼠体内ESRα和ESRβ在不同季节、不同器官中的差异表达，为研究ESRα和ESRβ的生物功能及其分子调控机制奠定基础，为研究黑线仓鼠的季节性繁殖调控机制提供科学依据，为鼠害的防治提供理论依据。首先，用RT-PCR方法克隆黑线仓鼠ESRα和ESRβ的cDNA序列，研究得到黑线仓鼠ESRα序列1017bp，全部为编码区，Genbank登陆号：KC345615；ESRβ的cDNA序列896bp，全部为编码区，Genbank登录号：KF267446。运用生物软件分别对二者的序列结构分析，发现ESRα存在14个磷酸化位点，ESRβ存在13个磷酸化位点，在二者的A/B功能区磷酸化位点存在差异，ESRα具有4个连续的丝氨酸磷酸化位点，而ESRβ则不具有这一结构，推测这跟两种受体在机体内的生理功能不同有关。二级结构预测发现ESRα和ESRβ都含有较多的α螺旋和Turn转角Coil卷曲螺旋，都具有较强的亲水性。构建ESRα和ESRβ的分子系统进化树结果显示二者都是与同是啮齿类的大鼠、小鼠最先聚为一类,其次是与灵长类的人和狒狒以及偶蹄目的绵羊、牛和野猪聚为一类，最后与原鸡和三文鱼聚类，二者的分子系统进化树结果与传统的分类结果相一致，显示ESRα和ESRβ功能的重要性和进化的相对保守性。其次，本研究采用实时荧光定量方法检测ESRα和ESRβ在黑线仓鼠不同组织的表达差异。结果显示：ESRα在子宫、卵巢、肾上腺、下丘脑、附睾的相对表达量高，ESRβ在卵巢、子宫、下丘脑、大脑、睾丸中相对表达量较高，二者在脾脏中的相对表达量都较低。对两种雌激素受体在同一组织的相对表达量分析发现，在雌性黑线仓鼠体内ESRα在下丘脑、肾上腺和子宫的相对表达量极显著高于ESRβ（P<0.01），ESRβ只在卵巢的表达量高于ESRα，二者差异不显著。在雄性黑线仓鼠体内，对比两种受体在同一组织的相对表达量，ESRβ在睾丸中的表达量显著高于ESRα (P<0.05)；在附睾、肾上腺、肾脏中ESRα的表达量高于ESRβ，在肾脏中二者的相对表达量存在极显著差异(P<0.01)；在下丘脑和大脑中，二者的差异不显著。最后，用实时荧光定量PCR的方法检测ESRα和ESRβ在不同季节黑线仓鼠体内不同组织的差异表达。结果显示：在雌性下丘脑中，ESRα的表达量有冬季>夏季>春季>秋季，冬季表达量与其他三个季节存在极显著差异（P<0.01）；ESRβ的表达量有冬季>夏季>秋季>春季，冬季表达量与春季和秋季的表达量有极显著差异(P<0.01)；不同季节的雌性下丘脑中，ESRα的相对表达量都高于ESRβ的表达量，冬季二者的表达有极显著差异（P<0.01）。在雄性下丘脑中，ESRα的相对表达有秋季>冬季>夏季>春季，ESRβ的相对表达没有季节性差异；不同季节的雄性下丘脑中，ESRβ的相对表达量都高于ESRα的表达量。在卵巢中，ESRα的相对表达量有春季>夏季>秋季>冬季，冬季与春季的相对表达量有显著差异（P<0.05）；ESRβ在卵巢中的相对表达量有冬季>秋季>春季>夏季，冬季和秋季的相对表量有极显著差异（P<0.01）；不同季节的卵巢中，ESRβ的相对表达量都高于ESRα的表达量，二者的相对表达在春季存在极显著差异（P<0.01），在夏季和秋季有显著差异(P<0.05)。在睾丸中，ESRα的相对表达量有冬季>夏季>春季>秋季，冬季的相对表达量与春季和秋季的相对表达量有极显著差异（P<0.01），与夏季的相对表达量有显著差异（P<0.05）；ESRβ在睾丸中的相对表达量有冬季>春季>夏季>秋季，冬季的相对表达量与其他三个季节有极显著差异(P<0.01)；在不同季节的睾丸中，ESRβ的相对表达量都高于ESRα，二者的相对表达在冬季有极显著差异（P<0.01）。因此推测：ESRα主要参与了雌激素参与的对黑线仓鼠季节性繁殖的负反馈调节，在生殖器官卵巢和睾丸中，ESRα和ESRβ协同参与黑线仓鼠的繁殖。