副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis，Hps)是猪革拉瑟病的病原体，是猪上呼吸道的一种常在菌，常作为继发性病原菌，在猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒II型、伪狂犬病病毒等感染后继发感染，甚至与一些细菌性疾病混合感染。主要导致保育期仔猪发生多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎等。近年来，该病的危害不断加重，给我国的养猪业造成巨大的经济损失。国内部分省市已成功分离获得当地的副猪嗜血杆菌菌株，并进行了流行病学研究，但陕西省副猪嗜血杆菌病的流行情况则报道较少。本研究利用传染病实验室从陕西省关中地区分离鉴定出的9株副猪嗜血杆菌制备出检测副猪嗜血杆菌血清抗体的平板凝集试验抗原，并对其进行了初步应用与评价。结果如下：1.为了制备检测副猪嗜血杆菌血清抗体的平板凝集抗原，本试验从传染病试验室复苏得9株副猪嗜血杆菌临床分离株，并对其进行了形态观察、PCR鉴定等。将9株副猪嗜血杆菌分离菌株分别接种于LB、TSA、巧克力琼脂等固体培养基上，接种12h后通过观察菌落大小，筛选出最适合副猪嗜血杆菌生长的固体培养基TSA（加0.01%NAD和5%的犊牛血清）和固体培养基巧克力琼脂（加0.008%NAD）。同时，将副猪嗜血杆菌分离菌株接种于LB、TSB等液体培养基中，培养至16h后，每隔4h分别取样，通过与麦氏比浊管对比确定细菌菌液大概浓度，筛选出最佳液体培养基为TSB（加了0.01%NAD和5%的犊牛血清），并确定其在TSB中培养时间以24h为宜。2.利用复苏的9株菌株，仿照布氏杆菌平板凝集抗原制备的方法(生物制品实验指导)，经细菌复苏、扩大培养、抗原制备、特异性试验等，研制成副猪嗜血杆菌平板凝集抗原，并最终确定血清做4倍稀释时，抗原最佳工作浓度为8×109CFU/mL，初步建立副猪嗜血杆菌平板凝集试验法。3.通过对9株临床分离菌株制备的副猪嗜血杆菌平板凝集抗原与276份血清反应，发现Ew株与血清凝集反应最强，选出Ew株作为制备抗原的最佳菌株，并对所建立的副猪嗜血杆菌平板凝集试验方法验证，结果表明，该方法具有特异性强、操作简便、快速等优点。4.为了解陕西省副猪嗜血杆菌病流行情况，采用本实验研制的平板凝集抗原，用平板凝集试验，对陕西省部分猪场猪进行血清抗体检测。检测疑似副猪嗜血杆菌病猪场4个，发病猪血清抗体平均阳性检出率为78.5%，检测结果与临床诊断结果相符。从陕北神木县的散养户猪场采集的50份血清中，检测出阳性3份，阳性检出率为6%；从猪场采集153份血清，检出阳性92份，阳性检出率为60%。检测结果显示，陕西省存在副猪嗜血杆菌不同程度的感染，规模猪场集中饲养的猪感染HPS的比率明显高于散户。研究结果为陕西省有效防制副猪嗜血杆菌病提供了参考依据。