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背景:胃癌(GC)作为全世界最常见的上消化道恶性肿瘤之一,也是中国人群癌症死亡的第二大原因。鉴于早期胃癌缺乏特异性的临床特征,在大多数患者难以体现出明显的症状。这也导致了胃癌的早期诊断非常困难,大部分患者在就诊时已发展到中晚期,只能通过手术及化疗延长生存时间。尽管目前胃癌的治愈率有所改善,但其术后死亡率及复发率仍居高不下。寻找具有低毒高效的抗肿瘤药物成为目前抗癌研究的热点之一。穗花杉双黄酮(AF)作为一种多酚类化合物,主要是从杉木的干燥根中提取。已证实穗花杉双黄酮具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗癌等多种药理活性。穗花杉双黄酮能够通过抑制组织蛋白酶B活化而发挥抑制肿瘤侵袭和转移的作用。此外,穗花杉双黄酮能够抑制血清中炎症介质的分泌,从而通过改善肿瘤微环境来抑制肿瘤的发生和转移。然而,穗花杉双黄酮对胃癌细胞的增殖抑制等作用的研究较少,其作用机制仍有待进一步探讨。
目的:研究穗花杉双黄酮对人胃腺癌细胞(AGS)和人胃癌高转移细胞(MKN-28)的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,并初步探讨其可能机制。
方法:用不同浓度的穗花杉双黄酮处理AGS细胞和MKN-28细胞,并通过MTT法测定验证细胞活力,实验采用不同浓度组,分别如下:对照组0μM,给药组浓度分别为50μM,75μM,100μM,200μM。采用MTT试剂盒和克隆形成实验、划痕法愈合和侵袭、流式细胞术和caspase-3活性检测试剂盒的方法检测胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。通过westernblot方法检测p53/p21信号蛋白水平的表达。
结果:1.MTT法筛选结果表明,与对照组相比,高浓度组(100μM,200μM)对于细胞活力的抑制效果更为明显,因此选择穗花杉双黄酮浓度为100μM和200μM用于后续的实验。2.穗花杉双黄酮在高浓度条件下可以显著抑制胃癌细胞增殖,并降低细胞活力和克隆效率,具有剂量依赖性。3.流式细胞术结果显示,与对照组相比,100μM和200μM的穗花杉双黄酮能够显著促进胃癌细胞的凋亡,同时增加胃癌细胞中caspase-3的活性。4.划痕修复实验和transwell-invasion实验显示,100μM和200μM的穗花杉双黄酮体能够明显抑制胃癌细胞的迁移和侵袭,且呈现出时间浓度依赖性。5.westernblot实验显示,穗花杉双黄酮能够显著上调p53和p21蛋白的表达,从而激活了胃癌细胞系AGS和MKN-28中的p53/p21信号传导。
结论:高浓度的穗花杉双黄酮可以抑制胃癌细胞的增殖、促进细胞凋亡并抑制细胞的迁移、侵袭能力,还激活胃癌细胞中p53/p21信号传导。
目的:研究穗花杉双黄酮对人胃腺癌细胞(AGS)和人胃癌高转移细胞(MKN-28)的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,并初步探讨其可能机制。
方法:用不同浓度的穗花杉双黄酮处理AGS细胞和MKN-28细胞,并通过MTT法测定验证细胞活力,实验采用不同浓度组,分别如下:对照组0μM,给药组浓度分别为50μM,75μM,100μM,200μM。采用MTT试剂盒和克隆形成实验、划痕法愈合和侵袭、流式细胞术和caspase-3活性检测试剂盒的方法检测胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。通过westernblot方法检测p53/p21信号蛋白水平的表达。
结果:1.MTT法筛选结果表明,与对照组相比,高浓度组(100μM,200μM)对于细胞活力的抑制效果更为明显,因此选择穗花杉双黄酮浓度为100μM和200μM用于后续的实验。2.穗花杉双黄酮在高浓度条件下可以显著抑制胃癌细胞增殖,并降低细胞活力和克隆效率,具有剂量依赖性。3.流式细胞术结果显示,与对照组相比,100μM和200μM的穗花杉双黄酮能够显著促进胃癌细胞的凋亡,同时增加胃癌细胞中caspase-3的活性。4.划痕修复实验和transwell-invasion实验显示,100μM和200μM的穗花杉双黄酮体能够明显抑制胃癌细胞的迁移和侵袭,且呈现出时间浓度依赖性。5.westernblot实验显示,穗花杉双黄酮能够显著上调p53和p21蛋白的表达,从而激活了胃癌细胞系AGS和MKN-28中的p53/p21信号传导。
结论:高浓度的穗花杉双黄酮可以抑制胃癌细胞的增殖、促进细胞凋亡并抑制细胞的迁移、侵袭能力,还激活胃癌细胞中p53/p21信号传导。