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生长激素(GH)基因、生长激素受体(GHR)基因和肌肉生长抑制素(MSTN)基因是与动物肉用性状有关的三个重要基因。本试验以9个肉兔纯系及其37个杂交组合为实验材料,采用测序和单链构象多态(SSCP)的分析方法,对GH、GHR和MSTN基因进行SNPs扫描和多态性分析,找到与家兔产肉性状有关的分子标记,为优质、高产家兔品种的选育提供一条分子育种途径,同时也为我国家兔品种的合理保护及科学利用提供可靠的理论依据。
GH基因:本研究对GH基因的全部核苷酸序列进行了扩增测序。PCR-SSCP分析及测序结果表明该基因5个外显子和4个内含子序列都相当保守,仅在5UTR区发现一处SNPs(C111T)。应用SAS软件对家兔群体不同基因型间的生长,屠宰及肉质性状值进行最小二乘一般线性模型(GLM)分析。发现该突变对家兔胴体重、背腰重、后腿重和皮重等屠宰性状及肌肉系水率、烹饪损失、熟肉率、肌内干物质含量和蛋白质含量等肉质性状都有显著性影响(P<0.05)。其中突变型个体的胴体重显著高于野生型和杂合型个体(P<0.05),但背腰重显著低于二者(P<0.05)。而后腿重这一性状上,杂合型个体的最小二乘均值最低,明显低于野生型和突变型。
GHR基因:本研究在GHR基因外显子lO上发现两个突变位点,分别为1797(T/C)和2067(C/T)。对1797(T/C)位点不同基因型肉用性状之间进行最小二乘分析结果显示,不同基因型个体间差异不显著(P>0.05)。2067(C/T)突变位点在35日龄体重、70日龄体重、胴体重、肝重、前腿重、背腰重、后腿重和皮重等屠宰性状及肌内干物质含量和蛋白质含量等肉质性状的最小二乘均值杂合型MN型个体显著优于NN型和MM型个体和(P<0.05)。
MSTN基因:本研究探讨了MSTN基因的全部3个外显子区及部分5UTR区的遗传多态性,发现在5UTR区476位点存在1处T/C的单碱基突变。通过分析MSTN基因不同基因型对屠宰和肉质性状的影响,结果表明该变异对肌肉的熟肉率、滴水损失和部分屠体性状有显著影响,MSTN的A等位基因具有降低熟肉率,肌肉滴水损失,提高胴体重、前腿重、背腰重、后腿重和皮重等效应。该结果提示MSTN基因此位点的突变有利于家兔体躯发育。
本研究在家兔GH、GHR和MSTN基因上找到4个单核苷酸多态性标记,并分析了它们与家兔产肉性状的关系,结果表明这三个基因都有可能是影响家兔的肌肉发育和生长的主效基因,或与控制这些性状的主效基因连锁。其中,GH基因和MSTN基因5UTR区突变及GHR基因2067(C/T)突变均可开发为用于家兔产肉性状选育的分子标记。为遗传改良家兔肉用品质、提高生产性能、选育优质高产品系或配套系提供了分子基础。