鸡球虫病由寄生在鸡肠上皮细胞内的艾美耳属多种球虫引发,该病发生率高,分布范围广,危害严重,给养鸡业造成严重的经济损失。长期以来,化学药物作为控制鸡球虫病的主流策略,使用化学药物防治鸡球虫病极易导致球虫产生耐药性,及鸡体抗球虫药物残留,从而影响人类健康。在饲料中添加各种抗球虫药虽然可以预防并控制球虫病,但往往诱发球虫的抗药性和药物残留等问题,是化学药物使用面临的挑战之一。中草药制剂的使用是防控鸡球虫病的有效策略之一,具有不易产生耐药性,毒副作用小等优点,具有较好的应用前景。本文通过体外传代细胞筛选法,确定有效天然化合物单体,并选择对应的有效中药组成方剂进行动物实验验证。首先,我们从华南部分地区主要为广东的部分地区不同规模的养鸡场采集粪便（垫料）样品,收集不同地理来源的球虫虫株,进行抗球虫药的耐药性调查,由于采样的特殊性,采样的鸡场均为发病鸡场。有针对性的采样,导致阳性率偏高。除广东揭阳和广东云浮两地,分离株中检测鸡球虫其他地区阳性率均为100%。全部都为混合感染,其中艾美耳球虫感染率67%,堆型艾美耳球虫感染率65%,这两类在感染中占绝对优势,属于优势虫种。根据卵囊强度统计,感染强度在“++++”的样品的所占比例42%,强度在“+++”的样品所占比例21%,感染强度在“++”的样品占21%,感染强度在“+”的样品占17%,卵囊强度偏高。根据所测11种目前应用较多抗球虫药物耐药性分析,耐药程度严重,同一株虫株,对多种药物同时耐药。球虫虫株对药物耐药性严重,通过结果可知拉沙洛西钠药物耐药性情况较轻,鸡球虫对其相对敏感。同时利用柔嫩艾美耳球虫MDBK细胞培养体系筛选单体化合物,获得在细胞上抗球虫生长效果较好的青蒿素、肉桂醛和常山酮。其中检测样品中,青蒿素和常山酮IC50值分别为7±0.6μM和2±0.3μM,敏感性较好。将其对应的中药成分,购买相应的中药,并根据鸡球虫病的特点和药典配伍禁忌,依据中药的有效成分和精简高效的原则组成三个中药方剂,通过观察治疗球虫病的临床效果,进行抗球虫方剂的筛选试验。通过中药复方抗球虫效果试验的动物实验,可筛选出方剂1（肉桂20、大黄10、青蒿20、仙鹤草18、伏龙肝20、陈皮18）和方剂3（白头翁1、仙鹤草1、青蒿1）效果优秀,方剂2（仙鹤草100、何首乌100,白头翁60、青蒿60、肉桂52）效果相对较差,并且在每只鸡每天1 g用量的时候效果最好,且在攻虫的当天给药效果相对更好,对抗柔嫩艾美耳球虫有一个较好的效果。方剂1和方剂3的ACI值分别为165.13和173.90,与药物对照组磺胺氯吡嗪钠的ACI值169.01相比,效果相当。以ELISA检测试剂盒测定各阶段鸡血清中细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-12水平变化来看,攻虫对照组在中整个实验过程中并无明显变化,中药方剂以及药物对照组血清中的细胞因子也基本保持稳定,说明试验中药物对鸡血清中细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-12水平没有影响。从临床病理组织切片来看,在攻虫的当天给药,抗球虫效果较好;攻虫前两天给药的鸡肠道会有轻微的炎性反应,分析原因可能是方剂的泻下作用会对鸡体肠道造成轻微损伤。结合体内外试验结果,对中药配方及使用剂量进行优化,进一步分析其抗球虫效果,为今后鸡球虫病的有效防控提供理论依据。