肾精亏虚对雄性小鼠之肝主筋功能影响的研究

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目的 成功复制肾精亏虚小鼠模型,以肾病及肝为切入点,从肝合筋方面研究肾肝关系,初步揭示肾肝相关理论的部分科学内涵。 方法 ①本实验设3组:将36只3月龄雄性昆明种小鼠随机取12只作为正常对照组,其余24只进行造模。其中模型组和补肝组采用惊恐加房劳的复合伤肾法制造肾精亏虚模型。每天每只雄鼠按照1:2的比例与动情期雌鼠合笼(合笼的雌鼠均被灌胃长效避孕药左炔诺孕酮炔雌醚片),每天下午8:00投入动情期雌鼠,次日上午8:00取出,下午8:00再投入另一批动情期雌鼠,次日上午8:00取出,如此反复,让其房劳伤肾;每日上午8:00~下午8:00,将雄鼠放入特制的小铁丝笼内,再将此小笼固定在装有一只大家猫的大笼中,让猫与小鼠仅一网之隔,使猫爪能碰到但无法抓到小鼠,并于每天上午10:00、下午3:00各另取两只活的小白鼠喂猫示众,使其惊恐伤肾。共连续21天。所有实验小鼠均自由饮食。②一贯煎(《柳州医话》):由生地黄15g,当归9g,枸杞子9g,北沙参9g,麦冬9g,川楝子6g组成,制成含生药0.5g/ml的合剂。补肝组小鼠按0.03ml/g体重·d灌胃。③观察各组小鼠一般情况,检测各组小鼠血糖、肌糖原及肝糖原含量。④免疫组化法观察各组小鼠骨骼肌组织乙酰胆碱酯酶活性的变化。⑤光镜下观察各组小鼠骨骼肌组织形态学的变化。透射电镜观察各组小鼠骨骼肌超微结构的变化。 结果 ①一般情况:造模后,模型组小鼠与正常组小鼠相比,体重明显下降(P<0.01),同时活动明显减少,行动迟缓,易受惊吓,反应迟钝,被毛脱落、稀疏、晦暗发黄、缺少光泽。②小鼠血糖、肌糖原及肝糖原含量:模型组血糖、肝糖原、肌糖原含量明显低于正常组,有极显著性差异(P<0.01)。补肝组血糖、肝糖原、肌糖原含量低于正常组,没有显著性差异(P>0.05);高于模型组,有极显著性差异(P<0.01)。③小鼠骨骼肌组织乙酰胆碱酯酶活性的变化:模型组灰度值明显高于正常组,有极显著性差异(P<0.01)。补肝组灰度值高于正常组,有极显著性差异(P<0.01);低于模型组,有极显著性差异(P<0.01)。模型组阳性率明显低于正常组,有极显著性差异(P<0.01)。补肝组阳性率低于正常组,有极显著性差异(P<0.01);高于模型组,有极显著性差异(P<0.01)。光镜下观察带有腓总神经的腓肠肌切片:模型组小鼠AchE染色较浅,分布稀疏离散,补肝组小鼠AchE染色介于正常组与模型组之间。④小鼠骨骼肌组织形态学:光镜下模型组小鼠骨骼肌见明显的病理变化:骨骼肌肌细胞排列紊乱,部分肌纤维膜细胞核肿胀密集,数目增多,少数肌纤维肥大,有空泡变性,或有肌纤维不连续,可见脂褐素沉积。补肝组基本正常,有新生的肌细胞。电镜下模型组小鼠骨骼肌见明显的病理改变:线粒体体积增大,呈肿胀状态,基质内出现多个亮区,有的全部变空,基质颗粒消失,嵴少,线粒体数目增多。而补肝
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