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1.生防菌的分离、筛选及其生物学特性的研究 本试验从甘肃各地采集的179份土样中分离得到481株细菌,对10种以上病原真菌有抑制作用的细菌有89株;用抑菌带一定殖力双重测定法,从中筛选出3株在辣椒根际定殖能力最好、抑制辣椒疫霉菌能力较强的生防菌F-152、Q-28和O-39。 生防菌生物学特性试验结果表明,3菌株的最适培养时间为20～28h;最适培养温度为30～37℃;最适培养液PH为6～8;通气量对3菌株的生长影响不明显。F-152生长的最适NaCL浓度为0.17%,蔗糖浓度为9%;Q-28和O-39生长的最适NaCL浓度为1.5%,蔗糖浓度为3%。 2.生防菌的鉴定 经培养性状和形态学特征的观察及生理生化特征的测定,初步鉴定F-152、Q-28和O-39菌株均为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa),但3菌株的培养性状和生理生化特征各有不同。F-152和O-39菌株的16S rDNA序列分析结果表明,它们分别与GenBank中已报道的Paenibacillus polymyxa 16S rDNA序列(登录号:AY302439和AY359622)有99%的相似性,由系统树可见F-152与O-39的亲缘关系较远,证实了形态特征与生理生化鉴定结果。F-152和O-39菌株保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏号分别为M206041和M206042。 3.生防菌在辣椒根部及根围土中的定殖动态研究 本试验结果表明,生防菌高浓度接种在辣椒根部及根围土中的定殖浓度始终高于低浓度接种的定殖密度,高浓度接种F-152、Q-28和O-39的定殖消长动态都是先降后升再降并逐渐保持稳定,到60天时,定殖密度仍可保持在3-5个数量级;接种辣椒疫霉菌对F-152的定殖影响较大,O-39次之,对Q-28的定殖影响不太明显;先接种生防菌后接种辣椒疫霉菌对生防菌的定殖影响较小,相反则影响较大。 4.生防菌室内抑菌控病效果研究 抑菌试验结果表明,3菌株的无菌滤液对辣椒疫霉菌的抑制率较低,但灭菌培养液的抑菌率有明显提高。3株生防菌浸种对辣椒种子发芽率都有明显的提高。温室试验结果表明,采用培养液灌根接种生防菌,以先接种生防菌,5天后接种病原菌,2天后再接种生防菌,待发病后再接种生防菌的方法处理,可得到最好的防治效果,即O-39、Q-28和F-152培养液28天时的防治效果分别为90.63%、88.40%和67.04%。 5.F-152与B-21原生质体融合选育多功能生防菌 通过对能有效定殖于辣椒根际的多粘类芽孢杆菌F-152(Rif~+、Em~-)菌株与无菌滤液能