【摘 要】
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目的：
胸腔积液是肺部多种疾病的常见并发症,它也是验证疾病病因,判断其良恶性的重要媒介。大约20%的胸腔积液是由恶性肿瘤引起,其中的50%又为原发性肺癌。约30%的肺癌患
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目的：
胸腔积液是肺部多种疾病的常见并发症,它也是验证疾病病因,判断其良恶性的重要媒介。大约20%的胸腔积液是由恶性肿瘤引起,其中的50%又为原发性肺癌。约30%的肺癌患者最初的临床表现是胸腔积液,而细胞病理学是诊断恶性胸腔积液的标准方法。肺癌病灶浸破脏层胸膜,常引起胸腔积液,癌细胞可同时或随后脱入胸腔内,形成胸腔脱落癌细胞。一旦误诊,发展为胸膜转移多在短期内死亡。
目前在临床上尚未发现检测原发性肺癌的公认指标。常规的细胞学检查主要是依靠癌细胞的形态特点进行诊断。由于癌细胞在积液中无组织及器官构架的束缚而自由漂浮和增生甚至经几代繁殖,失去了原来在组织中的形态特征,故单纯依靠形态学进行诊断敏感性较低,尤其是较早期异型性不太明显的癌细胞与反应性间皮细胞几乎无法区别,以至造成诊断结果中存在着相当数量的假阴性。建立一组科学、有效的诊断方法是提高肺癌诊断阳性率的有效途径,也是提高肺癌患者生存率与治愈率的关键。
本课题以目前国内外死亡率较高的肺癌为主攻对象,以肺癌患者的胸腔积液为检测基础,采用RT-PCR法测定癌细胞中SPlmRNA和hTERT mRNA的表达,探讨诊断以及鉴别诊断肺癌性胸腔积液的新途径,评价这二种指标单一和联合应用对诊断肺癌性胸腔积液的临床应用价值。
方法：
收集中国医科大学附属第一医院2010年5月至2011年1月门诊及住院患者胸腔积液103例,其中:肺癌65例以及肺良性疾病患者38例。
1、逆转录多聚酶链式反应(Reveresetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)扩增及扩增产物的分析
(1)收集胸腔积液中细胞沉渣提取总RNA。
(2)总RNA的反转录及SP1和hTERT基因片段的扩增。
(3)利用凝胶分析仪观察并分析结果。
结果：
1、RT-PCR检测,SplmRNA,hTERTmRNA在肺癌胸水中的表达高于良性胸水且有明显差异,其中单独检测SPlmRNA特异度最高,hTERTmRNA敏感度和准确度最高。
2、两检测指标单一及联合应用对肺癌性胸腔积液诊断效能的比较,在胸水中应用RT-PCR技术联合检测Sp1与hTERT的mRNA水平可作为诊断肺癌的有效辅助手段。联合检测Spl与hTERT的mRNA水平可获得最佳敏感度为100%。充分的提高了诊断的敏感度,可作为诊断肺癌的有效辅助手段,对诊断肺癌性胸腔积液有重要的临床价值。
结论：
1、SP1与hTERT在mRNA水平呈正相关。
2、在胸水中应用RT-PCR技术联合检测SP1与hTERT的mRNA水平可作为诊断肺癌的有效辅助手段。
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