【摘 要】
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人防御素是一类广谱抗菌阳离子小肽的总称,一般具有3~4个分子内二硫键.防御素对于细菌、真菌乃至某些被膜病毒有广谱杀伤作用,是免疫系统中的重要组分.该实验根据已发表的HNP
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人防御素是一类广谱抗菌阳离子小肽的总称,一般具有3~4个分子内二硫键.防御素对于细菌、真菌乃至某些被膜病毒有广谱杀伤作用,是免疫系统中的重要组分.该实验根据已发表的HNP-1 cDNA序列,设计并合成了一对引物.以HL-60细胞总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增目的片段并克隆到pUC18载体上,经筛选获得阳性重组子pUC18-HNP-1(pDFS1).测序分析证实,扩增片段即为HNP-1cDNA.pDFS1再经SmaI与SalI酶切、插入pGEX-6p-1质粒构建HNP-1表达载体.利用PCR技术和酶切反应筛选转化子最终获得pGEX-6p-1(pDFS2)重组质粒.HNP-1的克隆以及表达载体的构建为进一步研究其表达奠定了基础.
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