PC-B2对AFB1致L-02细胞DNA损伤及相关基因表达的影响

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunuplee
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:原花青素B2 (procyanidin B2,PC-B2)是一种广泛存在于植物中的多酚类化合物,具有清除自由基、抗癌等多种生物学功能。黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)是高温高湿地区常见的一种霉菌毒素,可导致肝细胞急、慢性损伤,流行病学研究表明,AFB1与人类肝癌的发生明显相关,其机制可能与AFB1代谢产物及代谢过程产生的自由基造成的氧化损伤有关。PC-B2在拮抗AFB1致肝细胞DNA氧化损伤方面的作用如何,相关文献较少。本研究旨在探讨PC-B2对AFB1致人肝细胞DNA氧化损伤的干预作用,探索其可能作用机制,为原花青素在防治AFB1相关肝病的合理应用提供理论和实验依据。方法:采用完全随机设计的体外细胞培养实验,以生长状态良好且处于对数期的人胚肝细胞(L-02细胞)为靶细胞,用不同浓度AFB1和PC-B2分别作用于L-02细胞并测定其细胞增殖活力的变化情况,并选择适宜的染毒和处理剂量;以选定剂量AFB1染毒,制备肝细胞损伤模型,用不同浓度PC-B2干预并进行分析。本实验分五个组:(1)空白对照组:只有L-02细胞和完全培养液;(2)溶剂对照组:加入含溶剂DMSO的培养液培养;(3)AFB1染毒组:加入含AFB1的培养液培养;(4)PC-B2处理组:分别加入含不同浓度PC-B2的培养液培养;以上各组细胞均孵育24h。(5)PC-B2干预组:先加入含PC-B2的培养液孵育12h,然后用新的含不同浓度PC-B2和一定剂量AFB1的培养液继续培养24h。实验后收集细胞进行分析,以MTT法测定细胞增殖活力的变化;通过酶联免疫吸附实验测定细胞中8-OHdG的含量,判断PC-B2对肝细胞DNA氧化损伤的影响,再应用荧光定量PCR法检测DNA修复基因hOGG1及其它相关基因的表达水平,实验从细胞和分子水平二个方面分析PC-B2拮抗AFB1致肝细胞损伤的作用与机制。结果:1.AFB1在10~40μg/ml的浓度范围内对L-02肝细胞生长呈剂量依赖性抑制作用,30μg/ml作用24h细胞增殖活力为69.9%,选为实验染毒浓度;PC-B2在100μg/ml时抑制细胞生长,25、50、75μg/ml促进细胞生长,且25μg/ml干预24h作用最明显,据此实验设计3、10、30μg/ml为PC-B2干预剂量。2.PC-B2干预组较30μg/ml AFB1染毒组细胞活力明显升高。高剂量干预组(30μg/ml PC-B2)与染毒组相比差异有统计学意义(P<0.05)3.AFB1染毒组8-OHdG(ng/ml)含量为2.779±0.089,明显高于溶剂对照组0.580+0.045(P<0.05);PC-B2干预组8-OHdG含量分别为2.550±0.078、2.376±0.109、1.873±0.065,均高于AFB1染毒组(P<0.05)。4.AFB1染毒组hOGG1基因表达明显低于对照组(P<0.05),PC-B2干预组细胞hOGG1基因表达明显高于AFB1染毒组(P<0.05),分别为AFB1染毒组的1.6、1.85、3.26倍。5.AFB1染毒组细胞Bcl-2/bax比值较对照组降低,PC-B2干预组则高于AFB1染毒组。结论:PC-B2在一定浓度范围内对L-02肝细胞的生长有促进作用,浓度太低无明显作用,太高则发挥抑制作用。适宜浓度的PC-B2干预能抑制AFB1所致肝细胞损伤。其机制可能通过调控修复基因hOGG1表达、参与肝细胞损伤过程中细胞凋亡的调控等而发挥作用。
其他文献
1988年4月4日上午,在福州西郊文林山隆重举行文林山革命陵园暨革命烈士纪念碑落成典礼。省市领导和各界群众代表800多人参加了这次活动。新落成的陵园,占地135亩,大门西侧门
在现阶段的经济发展的水平之下,我们的教育事业也随之发展得如火如荼,初中体育成绩已经纳入了中考成绩的一部分也有很多年了,可是我们还是可以看到,我们的学生很多时候都是在被动
改革开放以来,我国金融业发展取得了历史性成就.特别是党的十八大以来,我国有序推进金融改革发展、治理金融风险,金融业保持快速发展,金融改革开放有序推进,金融产品日益丰富
2020年初,武汉大规模爆发新型冠状病毒(2019-nCoV)感染的肺炎.中南建筑设计院股份有限公司医疗健康事业部在接到指令后12h完成武汉雷神山医院方案设计,为阻击疫情赢得宝贵时
2020年是国有企业纪检监察体制改革的关键一年,也是各家企业开创高质量发展新局面的关键一年,纪检监察工作必须适应新形势、展现新作为.
本文对水电施工企业中行政后勤管理工作的重要性以及主要职能进行了介绍,并对当前工作中存在的一些问题进行了讨论,对如何优化行政后勤管理工作提出了几点对策和建议.
目的:讨论全胸腔镜手术疗法在老年肺癌患者临床治疗中的应用效果及安全性.方法:选取在我院接受诊治处理的老年肺癌患者76例,随机划分为两组.参照组采取开胸肺癌根治术疗法,观
反应性管理是与核安全直接相关的重要环节,直接涉及到核电站的核安全.本文通过对三代核电机组的反应性管理体系进行研究,通过在机组调试和运行期间的试验结果,证明了该管理体
伴随着经济水平的提成,各行各业都在不断发展,电力企业也是如此,不管是电力企业的内部组织架构还是部门管理的力度,管理措施都在不断的加强,管理水平随之提升.作为电力企业的
当前,煤炭企业共青团工作在融入中心促发展、提素质育人才、出特色创品牌、建机制打基础,在服务青年成长、精神文明创建、团组织建设等方面做出了一定成绩,实现了新的突破.但