牦牛是青藏高原地区的一种特有畜种，在自然状态下，繁殖性能低。IVF生产牦牛和犏牛胚胎的效率普遍较低。本文研究了褪黑素（MT）对牦牛卵母细胞体外成熟及后续胚胎发育的影响，研究了体外生产条件的改变对性控犏牛胚胎发育的影响，并建立了早期性控犏牛胚胎的性别鉴定体系，为体外生产牦牛胚胎和母犏牛胚胎提供一定的科学依据，为西部牦牛和犏牛牧业发展起到一定的推动作用。研究结果如下：　　1.本试验研究了开放式和微滴法对牦牛卵母细胞孤雌发育的影响，结果表明：　　开放式培养（4 mL）的孤雌卵裂率（73.17±4.54%）显著高于微滴培养法（0.12-0.15 oocyte/μL）（61.64±3.27%）与微滴培养法（0.2-0.25 oocyte/μL） （54.09±3.83%）（P<0.05），但开放式培养（4 mL）的第一极体排出率和孤雌囊胚率与微滴培养法（0.12-0.15 oocyte/μL）的第一极体排出率和孤雌囊胚率差异不显著（P>0.05）。　　2. 本试验研究了不同浓度 MT 对牦牛卵母细胞体外成熟、孤雌发育、种内IVF和种间IVF的影响。　　结果表明：　　（1）牦牛成熟培养液中添加10-9mol/L MT，第一极体排出率，孤雌激活后的卵裂率和囊胚率均显著高于对照组（P>0.05）；　　（2）牦牛成熟培养液中添加10-9 mol/L MT浓度，体外受精生产牦牛胚胎和种间受精生产犏牛胚胎的卵裂率，囊胚率均显著高于无添加组（P>0.05），但孵化囊胚率无显著差异（P<0.05）；　　（3）10-7和10-9 mol/L MT处理的牦牛卵母细胞成熟液中，成熟后MⅡ期卵母细胞内GSH的含量（12.72±0.67ng/L和11.50±0.54ng/L）显著高于无添加组（9.44±0.57ng/L）（P<0.05）；　　（4）10-9 mol/L MT处理显著提高了牦牛卵丘细胞和成熟后卵母细胞的 GPx4 的表达水平（P<0.05），同时显著提高了成熟后牦牛卵母细胞BMP15的表达水平（P<0.05），降低了BAX的表达水平（P<0.05）。　　3.本试验对体外生产性控犏牛胚胎（牦牛♀×黄牛♂）的受精时间，精液浓度，卵丘细胞脱除程度，胚胎培养环境等生产条件进行探索。　　结果表明：　　（1）受精24 h的卵裂率和囊胚率显著高于受精6 h、18 h（P<0.05）；　　（2）性控精液的精子密度0.4~0.6×106个/mL与4~6×106个/mL时的卵裂率差异显著(P<0.05)，但囊胚率差异不显著（P>0.05），都显著高于性控精液0.04~0.06×106个/mL组的卵裂率和囊胚率（P<0.05）；　　（3）卵丘细胞不脱除组的囊胚率（23.42±2.07%）显著高于半脱除组（13.77±2.52%）和完全脱除组的囊胚率（15.61±2.22%）（P<0.05）；　　（4）性控犏牛早期胚胎在低氧培养环境下囊胚率（23.42±2.07%）显著高于高氧培养环境（11.83±1.73%）（P<0.05），而孵化囊胚率差异不显著（P>0.05）；　　（5）输卵管上皮细胞共培养的囊胚率（ 24.63±2.49%）和卵丘细胞共培养的囊胚率（23.42±2.07%）差异不显著（P>0.05），但均显著高于FBS CR1aa培养液的囊胚率（ P<0.05 ）；　　（6）种公牛 A 的囊胚率（ 18.90±2.31%）和 C 的囊胚率（19.33±2.26%）均显著高于B种公牛的囊胚率（P<0.05）；　　（7）精卵比例为1000:1的囊胚率显著高于精卵比例为670:1和1670:1的囊胚率（P<0.05）。　　4.本试验研究了MT对性控犏牛胚胎体外生产效率的影响。　　结果表明：　　（1）在卵母细胞成熟液和胚胎培养液中分别添加10-9mol/L MT所生产的性控犏牛胚胎，孵化囊胚率显著高于对照组（P<0.05），但囊胚率差异不显著（P>0.05），但两个处理组的囊胚细胞数均比对照组多；　　（2）成熟液中添加10-9mol/L MT能够显著上调 CAT 表达（P<0.05），但 BAX 的表达与对照组相比没有显著差异（P>0.05）。　　5.本试验采用了普通PCR和LAMP法进行胚胎性别的鉴定。　　结果表明：　　（1）简单PCR即可用于犏牛胚胎的性别鉴定；　　（2）PCR法与LAMP法测定结果一致。　　结论：　　两种方法均可用于早期性控犏牛性别鉴定。