该课题由三部分组成,集中研究了NO在口腔鳞癌发生过程中的双重作用及相关机制. 第一部分 采用免疫组化方法检测了40例口腔鳞癌组织中三型NOS、VEGF及FⅧRAg的蛋白表达,同时采用原位杂交技术检测了eNOS mRNA表达,目的在于探讨NOS表达与口腔鳞状细胞癌生物学行为及肿瘤血管生成之间的关系.第二部分 应用4NQO局部涂擦法诱发Wistar大鼠腭部鳞癌,探讨该模型用于口腔鳞癌研究的可行性以及NOS抑制剂L-NAME对肿瘤生长的影响,采用免疫组化技术检测iNOS和eNOS表达在大鼠腭粘膜癌变过程中的动态变化,进一步研究NO在口腔鳞癌发生过程中的作用.第三部分 采用结晶紫法、透射电镜(TEM)及琼脂糖凝胶电泳等方法,观察了外源性NO对口腔鳞癌TSCCa细胞的细胞毒作用和凋亡诱导作用;采用MTT法、免疫组化及吖啶橙染色等方法,观察了L-NAME对口腔鳞癌细胞增殖、DNA合成及eNOS蛋白表达的影响.总之,该研究结果表明NO在口腔鳞癌发生中的作用是复杂的、多方面的.一方面,人类口腔鳞癌组织中NOS表达增强可以引起NO合成升高,后者参与了口腔鳞癌发生发展过程中的启动、促进和演进等多个步骤:肿瘤组织中NO合成增加可以启动肿瘤发生过程中的DNA损伤和基因突变,增强DNA和RNA合成及肿瘤细胞增殖,促进肿瘤血管生成和转移或播散.NOS阻断剂可以抑制肿瘤瘤细胞的NOS表达及DNA和RNA合成,从而抑制肿瘤细胞的增殖.另一方面,过高浓度的NO通过诱导凋亡和直接细胞毒作用,又对口腔鳞癌细胞具有杀伤作用.NOS抑制剂和NO供体都有可能成为未来治疗口腔鳞癌的新药.