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目的了解溶血磷脂酸(LPA)对体外星形胶质细胞(AS)增殖和血脑屏障(BBB)模型通透性改变的影响,并探讨其可能机制。方法1、AS随机分为空白对照组、小剂量二辛烷甘油焦磷酸盐(DGPP)组、大剂量DGPP组、百日咳毒素(PTX)组、LPA组、大剂量DGPP+LPA组、小剂量DGPP+LPA组和PTX+LPA组;MTT和流式细胞仪(FCM)检测AS增殖,鬼笔环肽(Phalloidin)检测AS胞内F-actin变化;2、为探讨LPA促AS增殖机制,将AS随机分为空白对照组、Ro31-8220组、佛波脂(PMA)组、LPA组、Ro31-8220+PMA组和Ro31-8220+LPA组;同前法检测AS增殖和细胞内F-actin变化,Fura-2/AM检测细胞内钙离子浓度,Western Blot检测AS内蛋白激酶C-α(PKC-α)和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达;3、为了解LPA对血脑屏障(BBB)通透性影响,将体外培养的BBB模型分为空白对照组、LPA组和Ro31-8220+LPA组;γ计数仪检测BBB模型对125Ⅰ-牛血清白蛋白(125Ⅰ-BSA)的通过率,电子显微镜观察血脑屏障-紧密连接(BBB-TJ)改变,Phalloidin检测F-actin变化,FCM检测PKC-α阳性细胞比例,Western Blot检测BBB-TJ内claudin-5表达。结果1、LPA可使AS存活率以及S期细胞比例增加,AS形态改变,且以10μmol/L浓度LPA效果最佳;2、DGPP和PTX预处理可降低AS存活率以及S期细胞比例,与LPA组比较有统计学差异(P<0.01),但大剂量DGPP+LPA组较小剂量DGPP+LPA组抑制作用明显(P<0.01);3、LPA促使AS内[Ca2+]i浓度、PKC-α以及HIF-1α表达增加,与空白对照组比较有统计学差异(P<0.01);Ro31-8220+LPA组除HIF-α表达仍增加外,[Ca2+]i浓度和PKC-α表达均减少,与LPA组比较有统计学差异(P<0.01);4、LPA可使BBB模型125Ⅰ-BSA通过率和PKC-α表达增加,claudin-5表达减少,与空白对照组比较有统计学差异(P<0.01),同时LPA使BBB-TJ开放,细胞内F-actin重组;而Ro31-8220预处理后,LPA的上述能力均有所减弱。结论1、LPA经LPA1/3-Gi/o蛋白偶联受体促进AS增殖和形态改变,其机制可能与PKC-α/Ca2+信号途径以及HIF-1α相关;2、LPA可促进BBB-TJ开放,增加BBB通透性,其机制可能与PKC-α信号途径激活进而促使claudin-5表达下调以及F-actin重组有关。