论文部分内容阅读
繁殖力是养猪业中的最重要生产指标之一,提高猪的繁殖性能将会给养猪业带来巨大经济效应。猪GnRH基因、GnRHR基因、EPOR基因在猪的繁殖过程中起着重要的作用,是与猪繁殖力有关的重要候选基因。本实验采取TD-PCR的方法克隆了猪的GnRHR基因和EPOR基因,并对不同猪品种的GnRH基因、GnRHR基因、EPOR基因的关键部位做了PCR-SSCP多态性分析;应用RT-PCR的方法构建了3头大白猪母猪的EPOR基因的组织表达谱和与下丘脑-脑垂体-性腺轴相关的重要基因,包括GnRH基因、GnRHR基因、FSH基因、FSH受体基因、LH基因、FST基因、inhibin(a)基因、inhibinβ(a)基因、hzhibinβ(b)基因的关联组织表达谱。得到以下的结果:1.克隆了猪GnRHR基因和EPOR基因的大部分基因序列。2.在这三个基因的编码区均未发现多态性。3.在GnRHR基因的5′侧翼序列上发现了两处可能的功能性多态性位点,其中的一处是含有GAGA Box的插入突变序列,另一处由于点突变而形成了一个转录调控蛋白IRF-1结合序列,这两个转录调控序列已经被证明在动物很多基因的转录调控中发挥着至关重要的作用。实验结果表明在含有GAGA Box的插入突变处存在AA型、AB型和BB型三种基因型。基因频率在不同的猪品种间存在着很大的差异性,其中民猪与其它猪品种的差异性最大;IRF-1突变只存在于民猪中,并且只存在AA型和AB型两种基因型。4.根据EPOR基因的表达谱可知EPOR基因在猪的各个组织广泛分布。5.根据下丘脑-脑垂体-性腺轴主要基因的表达谱可推测在下丘脑-脑垂体-性腺轴外不存在GnRH、GnRHR、FSH、FSH受体、LH、FST、inhibin和activin之间的相互作用体系,它们在猪机体内可能还发挥除调节生殖周期以外的其它作用。