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研究背景:乳腺癌（Breast cancer,BC）是一种常见的恶性肿瘤,多发于女性,到目前为止在女性中的发病率和死亡率均处于恶性肿瘤第一位。近年来,乳腺癌发病呈现出年轻化趋势,因此研究早期乳腺癌的诊断方法是十分必要的。乳腺癌的诊断以病理活检居多,钼靶技术辅助,但这些检测手段都对患者造成不同程度的痛苦。伴随着乳腺癌诊断技术的发展,利用唾液作为诊断样本的研究渐渐增多,本实验室前期利用凝集素芯片技术分析了217例早期乳腺癌患者唾液样本中异常糖型的表达并建立数学模型,结果显示凝集素BS-I是单一凝集素中对于早期乳腺癌诊断灵敏度和特异性最高的（AUC:0.763,sensitivity:0.778,specificity:0.631）。本研究利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（MALDI-TOF/TOF-MS）进一步研究了凝集素BS-I识别的半乳糖基化的N-/O-连接聚糖,以此为抗癌药物的筛选、乳腺癌的早期诊断治疗打下了理论研究基础。实验方法:本研究以唾液作为检测样本,比较凝集素BS-I识别的健康志愿者（Healthy Volunteers,HV）,乳腺良性病变患者（Breast Benign cyst or tumor,BB）,乳腺癌早期患者（I/II Stage Breast Cancer,BC-I/BC-II）唾液蛋白糖链的表达差异。首先利用唾液芯片验证凝集素BS-I所识别糖链在四组唾液样本中的差异丰度差异,接着利用BS-I偶联磁性微粒分离糖蛋白,通过PNGase F酶切法和NaClO氧化法分别释放糖蛋白上的N-糖链与O-糖链,并对所获得的糖链采用MALDI-TOF/TOF-MS的方法解析糖蛋白糖链结构。实验结果:唾液芯片中凝集素BS-I识别的糖链结构在HV与BC-I组（Mean rank difference=2.00,p=0.008）、HV与BC-II组（Mean rank difference=2.21,p<0.001）、BB与BC-I组（Mean rank difference=1.51,p=0.044）、BB与BC-II组（Mean rank difference=1.67,p=0.008）有显著的统计学表达差异,而在HV与BB组（Mean rank difference=1.32,p=0.290）和BC-I与BC-II组（Mean rank difference=1.10,p=0.724）则没有明显差异。质谱鉴定的结果显示,在HV、BB、BC-I、BC-II组唾液中分别鉴定到了12/12、12/22、8/26、9/12种N-糖链/O-糖链,其中被BS-I特异识别的带有α-Gal,α-GalNAc,Galα1-3Gal,和Galα1-6Glc结构的N-糖链/O-糖链分别有11/10、10/19、7/24、7/9种。在鉴定出的糖链中,5个N-糖链（m/z 1753.945（NeuAc）1（GlcNAc）1（GalNAc）1+（Man）3（GlcNAc）2（Fuc）1,1767.975（Gal）2（Man）1（GlcNAc）1+（Man）3（GlcNAc）2（Fuc）1,2080.155（Fuc）2（GlcNAc）2（GalNAc）2+（Man）3（GlcNAc）2（Fuc）1,2938.666（Fuc）2（Gal）3（GlcNAc）4+（Man）3（GlcNAc）3（Fuc）1,3317.450（NeuAc）3（Fuc）2（Gal）3（GlcNAc）3+（Man）3（GlcNAc）2（Fuc）1）仅存在于HV组中,有2个N-糖链（m/z 3065.498（NeuAc）2（Fuc）2（Gal）4（GlcNAc）3+（Man）3（GlcNAc）2,3539.750（NeuAc）1（Gal）6（GlcNAc）6+（Man）3（GlcNAc）2（Fuc）1）和2个O-糖链（m/z 734.165（Fuc）2（Gal）1（GalNAc）1,896.124（Fuc）2（Gal）2（GalNAc）1）仅存在于BB组中,有1个N-糖链（m/z 2773.977,（NeuAc）1（Fuc）1（Gal）4（GlcNAc）3+（Man）3（GlcNAc）2（Fuc）1）和7个O-糖链（m/z 868.295（Fuc）1（GlcNAc）1（GalNAc）2,882.243（Fuc）1（Gal）1（Glc）1,884.270（NeuAc）2（GalNAc）1,915.285（NeuAc）1（Fuc）1（Gal）1（GalNAc）1,942.265（GlcNAc）2（GalNAc）1（Glc）1,1030.348（Fuc）1（GlcNAc）1（Gal）1（Glc）2和1351.418（Fuc）3（GlcNAc）1（Gal）1）仅存在于BC-I组中,有3个N-糖链（m/z 2101.805（Fuc）2（Gal）2（GlcNAc）2+（Man）3（GlcNAc）2（Fuc）1,2246.870（NeuAc）1（Fuc）1（Gal）2（GlcNAc）2+（Man）3（GlcNAc）2（Fuc）1,2392.909（NeuAc）1（Fuc）3（Gal）2（GlcNAc）2+（Man）3（GlcNAc）2）仅存在于BC-II组中。这些发现有助于根据唾液中半乳糖基化的N/O-聚糖来进一步研究乳腺癌的生物标志物。