第一部左旋氨氯地平对自发性高血压大鼠左室肥厚及内皮素-1表达的影响研究背景:高血压左心室肥厚是心血管事件的独立危险因素,与心律失常、猝死、心力衰竭等密切相关。目前认为高血压引起左室肥厚的主要原因包括血流动力学异常和神经内分泌激活。高血压致左心室负荷增加,心肌细胞受到机械刺激,肾素-血管紧张素-醛固酮系统、内皮素系统过度激活,导致蛋白质合成增加,心肌细胞肥大,间质胶原增多,进而引起心脏扩大,心脏舒张末压和收缩期室壁张力均增高,使左室功能受损。治疗高血压的主要目的是最大限度地降低心血管病发病和死亡的危险性,这就要求在治疗高血压的同时干预患者可逆性心血管病的危险因素。所以对于高血压患者提倡临床上早期干预,控制血压,逆转左室肥厚,改善受损的心功能,从而降低各种心血管并发症发生率,改善原发性高血压患者预后。研究目的:观察自发性高血压大鼠（SHR）的心脏形态学及左心室功能的改变;检测SHR心脏内皮素系统的变化及其与左室肥厚和左心室功能的关系;观察钙拮抗剂——左旋氨氯地平干预对SHR血压、左室肥厚及心功能的影响,探讨其与SHR心脏内皮素系统的关系。研究方法:1、SHR血压的变化及左旋氨氯地平干预对其影响20只13周龄的雄性SHR随机分为左旋氨氯地平治疗组（SHR-A）,高血压对照组（SHR-C）,同周龄Wistar—Kyoto（WKY）大鼠作为正常对照组。采用灌胃法给药,左旋氨氯地平组2mg/（kg·d）,溶于2ml生理盐水;对照组给予等量生理盐水,治疗时间为12周。采用尾动脉测压方法于用药前和用药后4、8、12周测定大鼠血压。2、SHR心室功能的变化及左旋氨氯地平干预对其影响全部动物末次给药后,25%乌拉坦（1g/kg）腹腔注射麻醉,仰卧固定于手术台上,颈前正中做约4cm的切口,分离出右侧颈总动脉,将导管经右颈总动脉插入左心室,记录心率（HR）、和左心室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）,左室舒张期末压（leftventricular end-diastolic pressure,LVEDP）和左室内压最大变化速率(±dp/dt_max)。分别用+dp/dt_max/LVSP和-dp/dt_max/LVSP来表示左室收缩舒张功能。3、SHR左室重量指数的变化及左旋氨氯地平干预对其影响沿室间隔剪开左右心室,称量左心室重量,计算左心室湿重/体重指数（LVW/BW）,用以表示左室肥厚程度。4、SHR心脏组织病理学改变及左旋氨氯地平干预对其影响实验末剪取心脏组织,行HE染色和Masson染色。使用Image ProPlus 5.0图像分析系统测量计算心肌细胞直径和心肌间质胶原容积分数（interstitial collagen volume fraction,ICVF）。ICVF=心肌间质胶原面积/所测视野面积。5、SHR左室内皮素-1的变化及左旋氨氯地平对其影响放射免疫法测定心肌组织ET含量,荧光实时定量PCR（Real-time PCR）法测定心肌preproET-1 mRNA的表达。研究结果:1、SHR血压的变化及左旋氨氯地平干预对其影响左旋氨氯地平可显著降低SHR血压,药物干预12周后,SHR-A组血压显著低于SHR-C组（154.23±7.99 mmHg vs 201.41±5.01 mmHg,P＜0.01）。2、SHR左心室功能的变化及左旋氨氯地平干预对其影响与WKY组大鼠相比,SHR-C组的LVSP（191.81±10.81 mmHg vs 106.06±11.49 mmHg,P＜0.01）明显升高,+dp/dtmax/LVSP（55.37±7.96 1/s vs 73.79±8.04 1/s,P＜0.01）与-dp/dtmax/LVSP（39.81±5.21 1/s vs 57.27±8.591/s,P＜0.01）显著降低,表明SHR存在左室收缩和舒张功能障碍;左旋氨氯地平治疗能够改善SHR的左室收缩功能（61.98±5.43 1/s vs 55.37±7.96 1/s,P＜0.05）与舒张功能（46.74±4.79 1/s vs 39.81±5.21 1/s,P＜0.05）,但尚未能使其恢复到正常水平。3、SHR左室重量指数的变化及左旋氨氯地平干预对其影响SHR-C组LVW/BW比值明显高于WKY组（2.94±0.11 mg/g vs 2.40±0.17 mg/g,P＜0.01）,表明SHR发生左室肥厚,而左旋氨氯地平干预组的LVW/BW比值较SHR对照组有明显降低（2.61±0.13 mg/g vs 2.94±0.11 mg/g,P＜0.05）,表明左旋氨氯地平在一定程度上能够抑制SHR的左室肥厚。4、SHR心脏组织病理学改变及左旋氨氯地平干预对其影响SHR左室心肌细胞直径显著大于WKY大鼠心肌细胞直径（16.13±2.79μm vs 12.57±3.16μm,P＜0.05）,左旋氨氯地平治疗后SHR心肌细胞肥大明显减轻,细胞直径与对照组SHR相比有统计学差异（14.3±2.85μm vs 16.13±2.79μm,P＜0.05）。SHR左室ICVF同WKY大鼠相比明显增高（12.38%vs 4.62%,P＜0.01）;左旋氨氯地平干预后胶原增生明显减轻,ICVF显著降低（7.36%vs 12.38%,P＜0.01）。5、SHR左室内皮素-1的变化及左旋氨氯地平对其影响SHR-C组的心肌ET-1含量与WKY组相比显著升高（207.69±16.09 pg/g vs 151.32±27.89 pg/g,P＜0.05）;左旋氨氯地平治疗能够降低SHR-A组心肌ET-1的水平（184.43±16.78pg/g vs 207.69±16.09,P＜0.05）。SHR-C组心肌组织preproET-1 mRNA的表达是WKY组的1.94倍（P＜0.01）;SHR-A组心肌组织preproET-1 mRNA的表达量是WKY组的1.54倍,与SHR-C组相比降低约20%,且两组具有显著性差异（P＜0.05）。研究结论:1、与WKY大鼠相比SHR发生左心室肥厚,心肌细胞肥大,胶原纤维增生。2、伴随着左室肥厚,SHR左心室收缩与舒张功能均受损。3、SHR心肌ET-1含量增加,preproET-1 mRNA表达增加。4、左旋氨氯地平干预能够降低SHR血压,减轻SHR左室肥厚程度,减少胶原纤维增生,改善SHR左心室收缩与舒张功能,其作用可能是通过降低血压、调节心脏内皮素系统实现的。第二部分左旋氨氯地平对自发性高血压大鼠内皮功能的保护作用研究背景:高血压会导致全身动脉功能和结构损害,早期发现和干预血管病变的进展是延缓和控制心血管事件的重要措施。研究目的:观察自发性高血压大鼠（SHR）胸主动脉舒张功能及血管壁结构的变化;观察钙拮抗剂——左旋氨氯地平干预对SHR胸主动脉内皮功能障碍及血管重构的影响并探讨其可能的机制。研究方法:1、SHR血压的变化及左旋氨氯地平干预对其影响20只13周龄的雄性SHR随机分为左旋氨氯地平治疗组（SHR-A）,高血压对照组（SHR-C）,同周龄Wistar—Kyoto（WKY）大鼠作为正常对照组。采用灌胃法给药,左旋氨氯地平组2mg/（kg·d）,溶于2ml生理盐水;对照组给予等量生理盐水,治疗时间为12周。采用尾动脉测压方法于用药前和用药后4、8、12周测定大鼠血压。2、SHR胸主动脉壁结构的改变及左旋氨氯地平干预对其影响取大鼠胸主动脉,行HE染色和Masson染色,Image-Pro Plus 5.0图像分析系统测量中膜厚度（media thickness,MT）及截面积（cross—sectional area,CSA）,光镜下观察中膜胶原含量变化。3、SHR主动脉内皮功能的变化及左旋氨氯地平干预对其影响观察离体胸主动脉对乙酰胆碱（ACh）及硝普钠（SNP）的反应性,比较SHR与WKY内皮功能的差异,以及左旋氨氯地平干预的作用。4、SHR氧化应力的变化及左旋氨氯地平干预对其影响检测三组大鼠血中NO、ET及SOD含量,比较SHR与WKY大鼠氧化应力的差异,并观察左旋氨氯地平干预对SHR氧化应力的影响。研究结果:1、SHR血压的变化及左旋氨氯地平干预对其影响研究结果显示,左旋氨氯地平可显著降低SHR血压,药物干预12周后,SHR-A组血压显著低于SHR-C组（154.23±7.99 mmHg vs 201.41±5.01 mmHg,P＜0.01）。2、SHR胸主动脉壁结构的改变及左旋氨氯地平干预对其影响与WKY大鼠相比,SHR胸主动脉中膜厚度（97±5μm vs 84±4μm,P＜0.05）及截面积（0.65±0.02 mm² vs 0.58±0.03 mm²,P＜0.05）明显增大,左旋氨氯地平治疗能够明显减小胸主动脉中膜厚度（91±3μm vs 97±5μm,P＜0.05）及截面积（0.62±0.02 mm² vs 0.65±0.02 mm²,P＜0.01）。SHR-C组大鼠主动脉中膜胶原纤维显著增生,排列紊乱,平滑肌细胞肥大增生明显,SHR-A组主动脉中膜弹性纤维较高血压组排列有序,平滑肌细胞肥大和胶原纤维增生减轻。2、SHR主动脉内皮功能的变化及左旋氨氯地平干预对其影响与WKY大鼠相比,SHR胸主动脉对ACh引起的内皮依赖性最大舒张反应明显减弱（34.71±9.23%vs 89.92±8.26%,P＜0.01）,左旋氨氯地平干预能够减轻内皮依赖性舒张功能障碍（48.39±14.86%vs 34.71±9.23%,P＜0.05）,左旋硝基精氨酸甲酯（L-NAME）能够消除这种差异。三组大鼠胸主动脉对SNP引起的非内皮依赖性最大舒张反应无显著差异（P＞0.05）。5、SHR氧化应力的变化及左旋氨氯地平干预对其影响SHR血清NO含量较WKY大鼠显著降低（27.98±4.53μmol/L vs 48.59±7.12μmol/,P＜0.01）,血清ET含量显著升高（207.69±16.81 ng/L vs 151.32±27.89 ng/L,P＜0.01）;左旋氨氯地平治疗组血清NO、SOD水平与对照组SHR相比明显升高（NO:36.66±7.52μmol/Lvs 27.98±4.53μmol/L,P＜0.05;SOD:229.22±20.38×10³U/L vs 200.13±6.85×10³U/L,P＜0.01）,血浆ET浓度显著降低（184.43±16.78 ng/L vs 207.69±16.81 ng/L,P＜0.05）。研究结论:1、SHR主动脉中膜厚度及截面积增大,血管发生重构。2、SHR的ACh引起的血管内皮依赖性舒张功能降低,内皮功能受损。3、左旋氨氯地平干预能够抑制SHR血管重构,改善内皮功能,这可能与左旋氨氯地平降低SHR氧化应力有关。