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猪链球菌(Streptococcus suis, SS)是一种重要的病原菌,可引起猪的脑膜炎、关节炎、心内膜炎、肺炎、败血症等,根据荚膜抗原不同,猪链球菌可分为33个血清型(1～31,33,1/2型),其中2型(SS2)毒力最强、分布最广,是一种重要的人畜共患病原,可导致人的死亡,严重危害养殖业和从业人员。目前已知的可能毒力因子包括溶菌酶释放蛋白(MRP),荚膜多糖(CPS),胞外因子(EF),溶菌素(SLY),甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)等,只有CPS是已经证实的毒力因子,其他的毒力因子以及致病机制仍不清楚,因此新的毒力相关因子有待发掘。RfeA(RTX family exoprotein A gene)属于RTX(Repeats in toxin family,RTX)家族,RTX是一种存在于许多细菌中的穿孔毒素,可以破坏宿主细胞膜,与细菌致病性相关。有报道称rfeA可以作为SS2的保护性抗原,是一种位于SS2表面的分泌蛋白。本文通过对SS2强毒株ZY05719和弱毒株T15的全基因组比对后,发现rfeA只存在于强毒的ZY05719中,通过PCR方法检测rfeA在不同的44株猪链球菌菌株中的基因分布情况,发现绝大多数菌株(38/44)中包含有rfeA,其中在32株2型强毒株都具有该基因, 因此推断该基因在猪链球菌2型中分布广泛。另外,通过对rfeA在ZY05719及其它猪链球菌基因组的生物信息学分析,发现rfeA与epf-like位于同一操纵子上且与ef邻近,它们之间有何关系,以及其在猪链球菌中的致病机制中起何作用,值得进一步研究。为了研究rfeA的致病机制,利用同源重组构建了rfeA的基因缺失株△rfeA,互补株C△rfeA,并通过斑马鱼模型对缺失株、野生株和互补株的毒力进行评估,结果发现缺失株毒力增强了,互补株的毒力基本回复到野生水平,但是三者基本生物学性状,如菌落形态特征、生长快慢等无明显改变。为了进一步研究其毒力增强的致病机制,通过Real-time PCR对各菌株中mrp,ef, cps2等毒力因子以及其邻近基因的转录水平进行了检测,发现这些基因在野生株、缺失株和互补株中表达水平接近,没有显著的差异。同时,与已知的调控系统如经典的一元调控系统,二元调控系统,真核生物类似的丝氨酸／苏氨酸激酶调控系统以及MicroRNA进行比对,发现rfeA并不属于上述体系。综合以上研究,rfeA可能是一个新的调控因子,或者它可以影响其他调控因子,但是具体的调控机制目前尚不清楚。