基于网络药理学探讨加味玉屏风口含片治疗过敏性鼻炎机制及制备工艺与质量分析研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dalianwaiguoyu
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目的:根据网络药理学探讨加味玉屏风(YPF)口含片治疗过敏性鼻炎(AR)的机制,并对其有效成分黄芪甲苷,白术内酯和多糖的最佳提取工艺及质量分析方法进行研究。方法:1.采用网络药理学对加味YPF口含片治疗过敏性鼻炎(AR)的黄芪甲苷、白术内酯等有效成分靶点、信号通路进行预测,构建加味YPF口含片有效成分-靶点-通路生物作用网络图、GO富集分析图、KEGG通路分析图并对其主要相关靶点、通路进行分析。2.对中药材提取分别采用温浸法、超声法和煎煮法提取工艺对黄芪甲苷,白术内酯和总多糖提取效果进行比较,针对不同性质的化学成分确定有效的提取工艺。3.采用HPLC-ELSD测定加味YPF口含片中黄芪甲苷的含量,采用HPLC法测定白术内酯I、II和III的含量,采用苯酚-硫酸比色法在490nm下测定总多糖的含量;同时对采用的测定方法进行方法学考察。结果:1.在加味YPF口含片中筛选出27个有效成分,涉及与AR相关19个蛋白靶点,其中黄芪17个靶点、白术8个靶点、防风14个靶点、甘草10个靶点、薄荷6个靶点。黄芪甲苷及白术内酯与AR相关的靶点分别为17个和7个,是加味YPF口含片治疗AR作用靶点较多的有效成分。主要信号通路为雌激素信号通路、抗原加工和递呈通路、NOD样受体信号通路、花生四烯酸代谢通路。加味YPF口含片通过作用上述靶点及通路而发挥抗炎、免疫调节作用,同时还通过上调上游靶基因诱导mi RNA-21表达,改善AR的Th1/Th2比值平衡,抑制NF-κB信号通路的激活来抑制炎症反应,同时YPF总糖苷也具有减少炎症及免疫调节作用。2.提取有效成分黄芪甲苷的最佳工艺为:黄芪温浸法提取,温度75℃,乙醇浓度85%,温浸时间90min,提取有效成分白术内酯的工艺为:白术粗粉乙醇超声提取,水煎煮提取多糖成分。3.黄芪甲苷的含量测定中,黄芪甲苷色谱条件为色谱柱Diamonsil C18,流动相为乙腈-水(34∶66),体积流量1.0ml/min,柱温35℃,漂移管温度105℃,载气流量2.5 L/min,进样量10μl;黄芪甲苷在0.416~1.664μg间呈良好线性关系(r=0.9996),RSD为1.89%(n=6)。白术内酯的含量测定中,采用高效液相色谱法通过波长切换,检测波长:220nm(白术内酯Ⅰ、Ⅲ),276nm(白术内酯Ⅱ)同时测定样品中白术内酯I、II和III,建立白术内酯I、II和III峰面积与浓度的关系得回归方程分别为Y=44826X-5012.5,r=0.9999;Y=61447X-8565,r=0.9999;Y=30086X-4492.1,r=0.9999,线性关系良好;白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ平均回收率分别为100.48%,99.85%,100.05%。多糖的含量测定中,以葡萄糖为对照品建立的吸光度与浓度的关系得回归方程Y=18.675X-0.0502,r=0.9998,结果表明葡萄糖的浓度在0.01~0.05μg/ml线性关系良好。上述测定方法学结果符合药典要求。结论:本文利用网络药理学预测和探讨了加味YPF口含片治疗AR作用机制,从系统生物学角度为加味YPF口含片治疗AR的作用机制提供了科学依据。处方中各有效成分提取工艺合理,制成的加味YPF口含片符合药典片剂的各项规定,完成了含片的质量标准拟定,测定方法与实验数据均稳定可靠。
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