本文以辅酶NAD⁺和聚乙二醇单甲醚（MPEG）为起始原料，通过羧基化、烷基化、Dimroth重排及缩合4步反应得到大分子化修饰的NAD⁺衍生物PEG-N⁶-（2-氨乙基）-NAD⁺。通过实验分别对这4步反应进行了优化，最终得到了较高的反应收率。第一步MPEG的羧基化反应以琼斯试剂为氧化剂，对影响反应的因素进行了优化，得到最佳的反应条件：原料中-OH含量：琼斯试剂中Cr含量=1∶1（摩尔比），反应温度为室温（20℃左右），反应时间16h，副产物经活性炭吸附去除，吸附时间3h，重结晶温度4℃，粗产物收率89.9％，结晶收率97.4％，反应总收率87.6％。产物中-COOH含量0.185mmol／g，毛细管熔点66～67℃。对影响第二步烷基化反应的因素进行了优化，得到最佳的反应条件为：pH3.5，35℃下避光反应50h，粗产物收率81.7％，离子交换层析纯化后产物收率67.3％。对影响第三步Dimroth重排反应的因素进行了优化，得到最佳的反应条件为：pH6.8，50℃下反应5h，粗产物收率88.2％，产物纯度78.6％，离子交换层析纯化后的产物收率69.3％。对影响第四步缩合反应时间的因素进行了优化，得到最佳的反应条件为：N⁶-（2-氨乙基）-NAD⁺：DCCI：MPEG-COOH=1∶2∶1.1，室温下反应5h，粗产物收率93.9％，经Sephadex G-50凝胶层析后交联产物收率84.8％。该大分子产物在pH10.0的碱性环境中能稳定存在3周以上，分解损失量不到10％；相同条件下NAD⁺的分解损失量高于60％。该产物在室温，pH8.0下与乙醇脱氢酶（ADH）反应的动力学参数为：V_max’=14.8μmol／L·min，K_m’=738μmol／L；同等条件下NAD⁺与ADH反应的动力学参数为：V_max=19.6μmol／L·min，K_m=127μmol／L。