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目的用性激素E2、P或E2+P作用于体外培养及荷瘤裸鼠的Hela细胞,检测细胞增殖、细胞周期及侵袭迁移能力的变化情况;初步评价激素干预对体外培养及荷瘤裸鼠体内HeLa细胞生长的影响,为临床进行宫颈腺癌激素替代治疗提供基础实验依据。方法1.采用免疫组化方法检测体外培养的人宫颈腺癌HeLa细胞雌、孕激素受体的表达;2.不同浓度的E2、P和E2+P分别与HeLa细胞共培养,用CCK8检测各实验组培养后24小时、48小时及72小时Hela细胞的OD值,以观察其增殖情况;3.用Transwell板检测E2、P和E2+P作用48小时后体外培养Hela细胞的细胞迁移、侵袭能力的变化;4.用流氏细胞仪检测E2、P和E2+P与Hela细胞共培养48小时后细胞周期及调亡的变化;5.于裸鼠双侧后肢背部皮下注射Hela细胞悬混液,24小时后分别予E2、P和E2+P腹腔注射治疗,每日一次,建立Hela细胞肿瘤的荷瘤裸鼠,并继续用E2,P和E2+P分组治疗,观察肿瘤生长情况及裸鼠存活时间的差异;结果1.用免疫组化二步法检测Hela细胞Er、Pr表达,发现体外培养的Hela细胞Er、Pr表达强阳性;2.结果显示,E2、P和E2+P三组的10μmol/L、100μmol/L浓度对Hela细胞生长均有抑制作用,尤其是在培养48小时与72小时后对Hela细胞的抑制作用明显,与对照组相比差异有统计学意义(p<0.05),且药物浓度更高的100μmol/L组对Hela细胞的抑制作用更强,而三种药物的其余浓度组(1μmol/L、0.1μmol/L、0.01μmol/L)对Hela细胞的生长影响不明显,与对照组相比无统计学意义(p>0.05),因此选择对细胞抑制作用最强的100μmol/l浓度组进行后续实验;实验的各药物浓度组均未观察到其对hela细胞生长的促进作用;3.hela细胞加入激素培养48小时后,经流式细胞仪检测空白对照组、e2、p和e2+p组的凋亡率分别为:5.40±2.38%、20.1±2.20%、20.03±1.91%、24.40±2.40%,各组凋亡率增加,与对照组相比差异有统计学意义(p<0.05),实验各组均未观察到细胞凋亡减少情况;细胞周期方面,实验观察到e2、p、e2+p组均表现为g0/g1期比例升高,s+g2/m期比例下降,与对照组相比,差异有统计学意义(p<0.05)。4、在我们的实验药物浓度下(100μmol/l)培养hela细胞48小时,单独e2或p对hela细胞迁移、侵袭能力无明显影响,细胞迁移及侵袭数与对照组相比差异无统计学意义(p>0.05),但e2+p联合使用对hela细胞迁移、侵袭能力减弱,迁移、侵袭细胞数与对照组相比有差异(p<0.05);在我们的实验药物浓度下未观察到对细胞迁移、侵袭的促进作用。5.一周后裸鼠成功建立hela细胞荷瘤裸鼠模型,肿瘤接种24小时即分别开始予e2、p和e2+p治疗,空白对照组、e2组、p组及e2+p组成瘤率分别是:87.5%(14/16)、100%(15/15)、81.25%(13/16)、100%(16/16),各组间成瘤率无明显差异(p>0.05)。实验裸鼠用药82天,空白对照组、e2组、p组及e2+p组的平均肿瘤体积分别是105.89mm3、450.17mm3、107.96mm3及168.94mm3,其中e2与对照组相比,肿瘤体积更大,有统计学意义(p<0.05),各组裸鼠体重之间差异无统计学意义(p>0.05);肿瘤体积最大者出自e2组,e2组的1号鼠有腹腔转移瘤(体重19.5g)、e2+p组的2号和7号鼠分别有头部及腹腔转移(二者体重分别为15g及9.9g),并且均在81天死亡,转移率分别为12.5%(1/8)及25%(2/8),其中e2组的转移瘤体积为171.5mm3,e2+p的转移瘤体积分别为1070mm3和600mm3,e2+p转移瘤体积明显更大。结论性激素e2、p及e2+p联合在一定浓度下对体外培养的hela细胞有抑制作用;适当溶度的e2+p可能降低体外培养的hela细胞的侵袭、迁移能力;在荷瘤裸鼠体内,一定浓度e2促进肿瘤生长,e2+p可能促进肿瘤细胞的早期转移。