白酒糟粗纤维降解真菌的筛选与降解工艺的初步研究

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白酒糟在我国资源丰富,是重要的可再生资源,它的资源化利用可解决当今面临的蛋白质饲料短缺、环境污染等问题。影响白酒糟转化为优质蛋白饲料重要限制性因素是其粗纤维和木质素难以降解。因此,亟待开发对白酒糟更有效的生物降解的方案,以满足白酒糟转化为优质蛋白质饲料的需求。本试验选取7株对动物和人体都安全的白腐真菌(佛州侧耳、大球盖菇、鸡腿菇、香菇、草菇、朱红栓菌和赤芝),通过测定其产木质素降解酶和纤维素酶的活力以及降解白酒糟和谷壳的能力,确定降解能力强的菌株,优化白酒糟和谷壳固态发酵降解工艺,并分析真菌菌丝对发酵饲料粗纤维检测的影响。研究结果如下:1、通过PDA-愈创木酚显色和PDA-苯胺蓝平板褪色反应初步筛选到产木质素降解酶较高的菌株:草菇、朱红栓菌、佛州侧耳和赤芝,再通过CMC-Na-刚果红平板和微晶纤维素-刚果红平板筛选出产纤维素酶能力强的菌株:草菇和佛州侧耳。2、比较各菌株在固态发酵酒糟时产酶能力以及对白酒糟的粗纤维和木质素降解能力,结果显示:产木质素降解酶活力由高到低的菌株次序为;赤芝>朱红栓菌>佛州侧耳>草菇;产纤维素酶活力由高到低为:佛州侧耳>草菇>朱红栓菌、赤芝;降解酒糟木质素能力最强菌株是赤芝,降解酒糟粗纤维能力最强的菌株是赤芝和佛州侧耳。在谷壳固态发酵中,佛州侧耳降解谷壳木质素能力最强,其次为草菇;佛州侧耳和草菇降解谷壳粗纤维的能力差异不显著。综合各菌产酶能力以及对白酒糟和谷壳的降解能力,对白酒糟和谷壳降解最有潜力的菌株为佛州侧耳。3、为优化佛州侧耳对白酒糟和谷壳的固态降解工艺,通过单因素试验、中心组合设计实验以及响应面优化等手段,获得优化的佛州侧耳降解谷壳培养基配方为:尿素1 g/L,KH2PO42.15 g/L,Mg SO42.05 g/L,酒石酸铵0.22 g/L,K2HPO40.20 g/L,Ca Cl2 0.01 g/L,VB10.001 g/L;优化的佛州侧耳降解酒糟培养基为:KH2PO41.07g/L,Mg SO4 3.04 g/L,酒石酸铵0.22 g/L,K2HPO40.20 g/L,Ca Cl2 0.01 g/L,VB10.001 g/L。与初始Krik培养基相比,优化培养基后佛州侧耳对谷壳粗纤维降解率由10.34%提高到17.08%,对白酒糟的粗纤维降解率由15.14%提高到28.60%。4、采用米根霉固态发酵麦麸,检测基质中粗纤维总量是否受菌丝浓度的影响,结果表明:固态发酵过程中基质的米根霉菌丝含量对粗纤维测定值影响较大。采用国标法检测培养7天的米根霉、佛州侧耳、哈茨木霉的菌丝粗纤维以及培养2天的产朊假丝酵母的粗纤维含量分别为33.36%、14.38%、17.14%和1.63%。由此可知,采用国标法检测固态发酵基质中粗纤维含量包含了真菌菌丝(菌体)的粗纤维含量。
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