葡萄根瘤蚜的荧光定量PCR检测及间种植物防控研究

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shijianwu2003
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
葡萄根瘤蚜Daktulosphaira vitifoliae(Fitch),属于同翅目(Homoptera),根瘤蚜科(Phylloxeridae),原产于北美洲落基山脉东部,是葡萄上的毁灭性害虫,为专食性害虫,只危害vitis属葡萄,是我国植物检疫性有害生物。1935年在我国首次发现葡萄根瘤蚜后,通过采取砍伐葡萄,使葡萄根瘤蚜销声匿迹,2005年在我国再次发生葡萄根瘤蚜危害。目前世界上主要利用嫁接抗性砧木防治葡萄根瘤蚜,没有其他有效防治方法。由于我国葡萄大多以扦插方式栽培,嫁接抗性砧木面积较少,葡萄根瘤蚜对我国迅速发展的葡萄产业构成严重威胁。同时,目前主要依靠常规土壤及根系调查葡萄根瘤蚜,但常规地面方法费时费力。因此,为了给葡萄根瘤蚜监测提供快速、准确、敏感性高的分子生物学调查方法,以及为葡萄根瘤蚜防控探索有效的方法,本试验对实时荧光定量PCR方法检测葡萄根瘤蚜、以及在葡萄园间作植物防控葡萄根瘤蚜进行了研究。主要结果总结如下:1.参考Karen Herbert等的方法,根据葡萄根瘤蚜ITS2中的保守序列设计的特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,通过试验验证上述引物和探针适用于我国葡萄根瘤蚜的检测,并且成功构建了标准质粒,制作出以标准阳性质粒作为标准品的标准曲线,经优化反应条件,建立了一种绝对定量检测葡萄根瘤蚜的实时荧光PCR方法。并对该方法进行敏感性和重复性试验,结果显示,该方法的灵敏度可达1.625 copies/μl,3次重复检测的变异系数均小于5%。提取0.25 g含有10头葡萄根瘤蚜若虫土壤的DNA,并将其梯度稀释,用建立的实时荧光定量PCR方法进行检测,结果表明,将DNA稀释10~3倍后,仍能检测出阳性结果,同时,对受害葡萄根际土壤检测结果也为阳性。葡萄根瘤蚜TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测技术具有特异性强,敏感性高,易操作等优点,有很好的应用前景和研究价值。2.按照杀虫活性,经济合理性,耐阴性,植株高度等筛选原则,选取裂叶荆芥、黄芩和黄芪三种植物作为防控葡萄根瘤蚜的间作植物,并且在果实成熟期对葡萄树势进行调查,在葡萄根系第二次生长高峰时和越冬时,对0-15 cm土壤层的葡萄根瘤蚜种群数量进行调查。研究结果表明,间作裂叶荆芥、黄芩和黄芪三种植物对葡萄根瘤蚜种群的控制均有显著效果,其中间作荆芥在葡萄树势恢复方面也有较明显的作用。另外,在成熟期根系调查中发现裂叶黄芪有促进葡萄根系生长的作用,所以采用葡萄园间作植物的方法对防控葡萄根瘤蚜及树势的恢复均可达到较好的效果,可以作为未来葡萄根瘤蚜防治的研究方向。
其他文献
据统计数字表明,加拿大有890万家庭拥有电视机,这是个不大的数字。实际上,国内每个人都拥有电视或能看上电视。 According to statistics, there are 8.9 million househol
目的:分析在接种门诊服务过程中的现状、问题以及相应对策.方法:收集我市接种门诊在1年内的资料,对其中的状况进行分析,找出存在问题,并且制定出相应对策,保证到接种门诊工作
目的:探讨基于微信平台的健康教育应用于青中年支气管哮喘患者的效果.方法:将82例青中年支气管哮喘患者随机分为观察组与对照组,每组41例.对照组患者给予常规健康教育,观察组
目的:观察重症监护室深静脉置管病人护理中应用临床护理路径的护理效果.方法:选取重症监护室收治的70例深静脉置管病人随机分为两组,每组35例,对照组给予常规护理,观察组应用
目的:观察认知护理对精神分裂症病人疾病自我管理水平的影响.方法:选择2018年2月—2019年1月期间在本院精神卫生中心治疗的精神分裂症病人58例,采用数字表法随机分为观察且与
目的:探讨护理干预在小儿支气管肺炎中的应用效果.方法:本次研究病例为2016年8月—2018年6月在我院治疗的支气管肺炎小儿患者共48例,将患儿随机分为观察组和对照组各24例,对
目的:分析和研究脑外科护理的相关安全隐患和针对性防范措施.方法:研究脑外科存在的安全隐患和预防医疗纠纷事件的措施,对其进行分析和统计,进而探索有效的安全隐患防范措施.
目的:探讨围手术期护理干预对急性阑尾炎手术患者的临床效果.方法:选取2016年1月—2018年12月在我院接受急性阑尾炎治疗的患者150例,按照数字表法将患者随机分为两组,对照组7
目的:探讨细节化护理在妇产科护理中的应用效果.方法:以本院妇产科2017年3月—2018年3月接受治疗的124名患者作为实验对象,分为对照组与实验组,对照组给予常规护理,实验组在
黄瓜花叶病毒(CucumberMosaicVirus,CMV)是严重危害农作物的病毒之一。番茄花叶病毒(Tomatomosaicvirus,ToMV)常常与此种病毒复合侵染加工番茄,引起加工番茄条斑坏死病毒病。