葡萄风信子植株再生体系研究

来源 :南京林业大学 | 被引量 : 8次 | 上传用户:changaty
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葡萄风信子是一种从欧洲引进的鳞茎类优良观赏花卉。本文以葡萄风信子的鳞片、叶片和花芽为外植体,通过器官发生和体细胞胚胎发生两种形态发生方式,研究了葡萄风信子在组织培养条件下,不定芽的诱导、分化、伸长及生根,以及胚性愈伤和体细胞胚的诱导。主要结果如下:以葡萄风信子的鳞片为外植体的实验中,采用了三组不同的培养基。研究结果表明:鳞片是非常适合器官发生的外植体,在直接器官发生和间接器官发生途径上均得到了再生植株。其中植物生长调节因素影响显著。单独添加低浓度BA的MS培养基上,能诱导出少量体积小、生长缓慢的不定芽。高浓度的IBA和BA组合非常适合不定芽的诱导,于MS + IBA 2.0 mg/L + BA 2 .0 mg/L培养基上最早获得了不定芽,最高诱导率可达到80%,且以MS + IBA 5.0 mg/L + BA 5 .0 mg/L培养基上的鳞片产生不定芽数量为最多。含有0.1 mg/L或0.2 mg/L 2,4-D和1.0 mg/L BA的MS培养基先诱导出了淡绿色、致密的愈伤组织,进而从愈伤上得到了不定芽,为间接器官发生形式。不定芽在生根培养基上培养30天左右可形成不定根,在根长2cm时打开培养瓶炼苗3~5天即可进行移栽。实验中将鳞片切割成上、中、下三个部分,在含有IBA和BA的MS培养基上得出诱导鳞片分化不定芽的最佳部位为中部,其次是下部,上部为最差。两种不同器官发生方式还出现在以叶片和花芽为外植体的研究中。不同的培养基诱导率也各不相同。花托和花梗主要以直接器官发生的方式产生不定芽,在MS + 2,4-D 0.1mg/L + BA 1.0 mg/L培养基上两者的诱导率均为100%。MS + IBA 5.0 mg/L + BA 5 .0 mg/L组合能使77.8%花梗直接产生不定芽,而花托在此培养基上的的诱导率只有8.6%,却在MS + IBA 3.0 mg/L + BA 3 .0 mg/L上得到了100%的诱导率。其他部位如花瓣、子房和叶片均先产生淡黄色的愈伤组织,进而诱导出不定芽。MS + 2,4-D 0.1mg/L + BA 1.0 mg/L和MS + IBA 3.0 mg/L + BA 3 .0 mg/L最适合愈伤组织的诱导。以叶片为外植体置于不同的培养基上还能通过体细胞胚胎发生方式获得葡萄风信子的体细胞胚。诱导愈伤的最佳培养基为MS + NAA 0.5 mg/L + BA 1.0mg/L。在此培养基中,叶片的愈伤诱导率为100%。并且得到淡黄色结节状愈伤和白色透明易碎状两种不同形态的愈伤组织,其中白色透明易碎状愈伤组织是具有胚性的。将胚性愈伤接种于同种新鲜培养基中进行继代培养。一段时间后,即可观察到白色体细胞胚从愈伤上脱落。上述研究通过器官发生和体细胞胚胎发生两种方式为葡萄风信子的植株再生,以及大量、快速繁殖体系的建立奠定了良好的基础。
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